2021 Fiscal Year Research-status Report
乳癌転移性脳腫瘍モデルに対する間葉系幹細胞を用いた腫瘍溶解性ウイルス投与法の開発
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19K16873
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| Research Institution | Juntendo University |
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Principal Investigator |
清水 勇三郎 順天堂大学, 医学部, 助教 (70835511)
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2019-04-01 – 2023-03-31
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| Keywords | 転移性脳腫瘍 / 腫瘍溶解性ウイルス / 間葉系幹細胞 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
転移性脳腫瘍を形成しやすい傾向のあるヒト由来乳がん細胞株を複数入手し、in vivoの実験を継続している。
マウスの転移性脳腫瘍モデル作成および薬剤頸動脈投与を行うための実験機材、設備を整え実験を開始している。マウスモデル作成の実験として、ヒト由来乳癌細胞株にLuciferaseを遺伝子導入してから、内頸動脈から動脈注射する実験を行った。一定期間の飼育の後、in vivo イメージングシステムにて腫瘍形成を評価したが、頭蓋外への腫瘍形成を認めた。また、別のモデル作成の方法として、同細胞を心房内に注射して腫瘍形成を評価したが、脊髄や体幹部への腫瘍形成を示す結果となった。
今後は、転移性脳腫瘍を形成しやすく、なおかつこれまでのin vitroの実験において間葉系幹細胞の指向性が高いと評価された細胞株を用いて同様の実験を行い腫瘍形成を評価していく予定である。その他の計画として、これまではNudeマウスを用いて実験を行っていたが、より腫瘍形成をしやすい環境を作るため、免疫不全レベルの高いSCID Beigeマウスを用いた実験も行う予定である。
その他に、より臨床に即した実験系をたてるために、患者由来の乳癌細胞株樹立も継続して行なっている。手術により摘出した乳癌原発の転移性脳腫瘍検体を用いて初代細胞培養を行っている。培地は従来の血清を含むものに加え、腫瘍の幹細胞性を維持した株を樹立するため無血清培地を用いた樹立の実験を行なっている。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
COVID-19の流行の影響により、学内研究の中断があり、また共同研究施設からのウイルス入手に時間を要したため。
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| Strategy for Future Research Activity |
共同研究施設より腫瘍溶解性ウイルスであるDelta-24-RGDを入手しているので、今後は乳癌細胞に対する殺傷効果をin vitroおよびin vivoでも示していく。
また、転移性脳腫瘍モデルの樹立および患者由来乳癌細胞株樹立の実験を継続する。具体的には、複数の乳がん細胞株を用いて免疫不全マウスの頸動脈から投与し、脳腫瘍を多発的に形成することをルシフェラーゼを用いた生体イメージングおよび、摘出脳の組織免疫学的染色にて評価、確認し、適切な細胞株の選出を行い、その後にin vivoでの腫瘍殺傷効果を確認する。
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| Causes of Carryover |
in vitroの実験に時間を要し、in vivoで使用予定であった実験用マウスの購入が少なくなったため。
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