Diversity of pathophysiological functions of alpha synuclein in age-related endothelial dysfunction as a secretory factor

2021 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 19K16949
• Research Institution: Osaka University
• Principal Investigator: 永澤 元規 大阪大学, 医学系研究科, 招へい教員 (00823535)
• Project Period (FY): 2019-04-01 – 2022-03-31
• Keywords: αシヌクレイン / 血管内皮 / eNOS / oligomer

Outline of Annual Research Achievements

①これまでの検討にて、αシヌクレイン（SNCA）モノマーは血管内皮細胞においてeNOS活性化作用、抗炎症作用を有し、血管内皮機能に対して保護的な作用を呈するが、preformed fibril(PFF)は炎症を惹起し、eNOSの発現を低下させることを確認した。また、血管内皮細胞にPFFやTLR2のagonistであるPam3CSK4を添加するとTLR2の発現が上昇することも確認していた。PFFの血管内皮細胞への炎症作用の機序として、神経細胞由来のPFFがTLR2を介してミクログリアの炎症を惹起するとの報告に基づき（Nat Commun. 2013;4:1562.）、同様の機序が存在するかをTLR2のsiRNAを用いて検討した。TLR2をノックダウンしたHUVECでは明らかなPFF添加による炎症性分子発現低下を認めなかったため、TLR2以外のメカニズムが存在する可能性が考えられた。
②HUVECにおいてsiRNAにてSNCAをノックダウンした蛋白溶液とscrambleの蛋白溶液をSNCA で免疫沈降後、SDS PAGE で電気泳動し、銀染色にて各々差異を認めたバンドを質量分析にかけ、SNCA と結合する蛋白を検索したところ、候補としてTSP-1（Thrombospondin 1）が検出できた。TSP-1は血中にも含まれるため、液性因子としてのSNCAと血中で結合し、SNCAの機能修飾をしている可能性を考えた。今後、その視点からの液性因子としてのSNCAの機能を検討していきたいと考えている。