自閉スペクトラム症の早期療育の有効性に関するメカニズムの解明

2022 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 19K17103
• Research Institution: Hirosaki University
• Principal Investigator: 坂本 由唯 弘前大学, 医学部附属病院, 助教 (60770386)
• Project Period (FY): 2019-04-01 – 2024-03-31
• Keywords: Fmr1 / 自閉スペクトラム症 / 養育行動 / USV

Outline of Annual Research Achievements

これまでに構築した実験プロトコルを用いて、自閉スペクトラム症（ASD）モデル動物であるFmr1-knockout(KO)マウスの行動実験を行った。ヘテロの母マウスによる出産当日の巣作りと生後3日目の養育行動をスコアリングし、母マウスの養育を記録した。生後7日目の仔マウスの超音波発声（USV）や、生後6週目および8週目の仔マウスのself-groomingとAffiliative social interaction試験、Three chamber試験を実施した。KO仔マウス12匹、ワイルドタイプ（WT）仔マウス10匹と、その母マウスの行動実験が終了し、現在、母マウスの養育行動と仔マウスのASD様行動について解析ソフトを用いて解析を進めている。
また、臨床治験において単独投与及び療育との併用でASDへの治療効果が確認されているBumetanideも用いて、養育行動やBumetanideがASD症状に与える影響についても調査している。出産前日の母マウスにBumetanideを経口投与し、上記実験プロトコルで母マウスの養育行動や仔マウスのUSVやASD様行動を記録した。母体にBumetanideを投与したKO仔マウス12匹とWT仔マウス12匹の行動実験を行った。実験データを解析しながら母マウスへのBunetanide投与の有無や母マウスの養育行動が、仔マウスのASD様行動に対して与える影響について調査している。2022年度、仔マウスUSVの解析に機械学習を用いた自動解析ソフトを導入した。その解析結果を研究補助者2名が目視で確認し波形分類を行っている。行動実験は完了し、現在、行動実験記録をもとに解析作業を進めている。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

当初、USVの波形分類および数のカウントを目視で行っていたため膨大な時間を要し、律速段階となった。自動解析ソフトの導入により解析に要する時間は短縮され、この問題は解決済みである。

Strategy for Future Research Activity

行動実験記録をもとに、USVの波形・数の解析、self-grooming、Affiliative social interaction試験、Three chamber試験の解析作業を進める。

Causes of Carryover

解析作業に時間がかかり、2022年度中に研究を完了させることができなかった。2023年度は研究補助者に解析補助を依頼し研究を完了させる計画である。