2021 Fiscal Year Research-status Report
Analysis of cancer cell dynamics after proton irradiation using real-time imaging
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19K17175
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| Research Institution | Nagoya City University |
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Principal Investigator |
橋本 眞吾 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(医学), 助教 (90803510)
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| Project Period (FY) |
2019-04-01 – 2023-03-31
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| Keywords | X線 / 陽子線 / DNA二本鎖切断 / γH2AX |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本年度はコロナウィルス感染拡大防止で施設間移動が制限されていたこともあり、研究代表者が所属する施設内で、陽子線とX線の生物学的効果比較に必要な基礎実験をX線を用いて行った。 主な研究内容を以下に示す。
γH2AXは感度の高いDNA二本鎖切断（DSB）のマーカーであり、CT検査などの数10 mGy程度の低線量放射線被ばく後であってもDNA損傷の評価が可能である。多くの報告では、γH2AX染色のタイミングを被ばく15分後に設定しているが、亜致死損傷の回復（SLDR）によるDNA修復動態を考慮すると、15分後が至適なタイミングかどうかに関しては議論が分かれる。そこで、我々はDNA損傷が固定化される数時間後のほうがより細胞生存率を推定するという仮説をたて、ヒト・哺乳類培養細胞を用いて、至適な染色タイミングを検討した。
ヒトHeLa S3細胞、マウスEMT6乳腺肉腫、B16F0メラノーマ細胞に対し10、50、150、500、2000、4000 mGyのＸ線照射後、それぞれ15分、2、6、12、24時間後にγH2AX免疫染色を行い蛍光顕微鏡下1核あたりのγH2AX foci数・蛍光量を計数した。また、DNA損傷と細胞生存率の関係を調べるため、コロニー試験により細胞生存率（Surviving fraction）とγH2AX fociのコントロールに対する相対的なfoci数・蛍光量の相関関係を求めた。細胞増殖の影響が予想されたため、全視野の核数変化も測定も同時に行った。
現在、結果を集計しており、今後、評価をしていく。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
コロナウィルス感染防止対策により、施設間を跨いだ移動が制限されている時期もあったため、まずは研究代表者が所属する施設内でできる実験を実施し今後評価をしていく。
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| Strategy for Future Research Activity |
コロナウィルス感染症の蔓延に伴い、今後もいつ施設間の移動が制限されるかわからないため、主たる勤務地で可能な実験系を継続していく。得られた実験結果を評価し、細胞生存率を推測するために最適な実験系の確立を目指す。
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| Causes of Carryover |
研究実施計画が遅れていることにより研究予定を変更したため、次年度使用額が生じた。研究を遂行するための物品購入や情報収集のための学会参加、論文投稿 費などにあてる予定である。
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Research Products
(1 results)
