羊水由来iPS細胞を用いた体表欠損の治療法の開発-脊髄髄膜瘤・腹壁破裂への応用-

2020 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 19K17317
• Research Institution: National Center for Child Health and Development
• Principal Investigator: 田沼 有希子 国立研究開発法人国立成育医療研究センター, 細胞医療研究部, リサーチアソシエイト (40595328)
• Project Period (FY): 2019-04-01 – 2022-03-31
• Keywords: 培養表皮 / iPS細胞 / 3次元培養 / ケラチノサイト / 胎児治療

Outline of Annual Research Achievements

胎児異常のうち脊髄髄膜瘤や腹壁破裂といった体表が欠損する疾患は、子宮腔内に消化管や脊髄といった臓器が露出し、胎児期から進行性の臓器障害を引き起こす。本研究では、羊水由来iPS細胞から培養表皮を作製し、胎内で欠損部に自家移植することで進行性の臓器障害を軽減し予後の改善を目指す。
多能性幹細胞由来の体性幹細胞は、その分化誘導効率や誘導した細胞の維持が難しいことが克服すべき点である。初年度は、羊水iPS細胞からケラチノサイトへの分化誘導とその維持培養法の検討及び評価を行い、feeder layer上でROCK inhibitorを添加した培地による培養法により長期培養できることを確認した。しかしながら、由来するiPS細胞により非ケラチノサイトが増殖し、効率的に3D皮膚を作製し得ないことが問題点として挙げられた。非ケラチノサイトを除去しながら長期的な培養を可能にする方法として、他の培養法を導入し機能評価を行った。ケラチノサイトの効率的な維持培養が3D皮膚作製の効率化に繋がることから、多能性幹細胞由来ケラチノサイトの維持培養法の改良を進めている。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

iPS細胞から分化誘導したケラチノサイトの培養方法の改良を重ね、より機能的な3D皮膚の作製を目指している。

Strategy for Future Research Activity

iPS細胞から分化誘導したケラチノサイトを用いた移植用表皮の作製効率を上げる。皮膚欠損動物モデルを作製し、3D皮膚移植を行いその機能評価を行う。

Causes of Carryover

理由：試薬の納品が年度内に間に合わなかったため。
使用計画：次年度の消耗品の購入に充当する。