2019 Fiscal Year Research-status Report
Development of liquid biopsy using exosomes released from patient-derived colorectal adenoma organoid
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19K17421
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Research Institution | Tohoku University |
Principal Investigator |
諸井 林太郎 東北大学, 医学系研究科, 非常勤講師 (90803594)
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Project Period (FY) |
2019-04-01 – 2021-03-31
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Keywords | 大腸腺腫 / リキッドバイオプシー |
Outline of Annual Research Achievements |
大腸腺腫、早期大腸癌に対して内視鏡的粘膜下層剥離術(ESD)で切除した標本から大腸正常オルガノイド培養株(n=3)、大腸腫瘍オルガノイド培養株(n=4)を樹立した。数回の継代後、細胞培養上清から超遠心によりエクソソームを回収しエクソソームmiRNAの抽出を行った。エクソソームはnano sightを用いた観察で抽出を確認した。また、エクソソームmicroRNAは、バイオアナライザーで回収されていることを確認した。エクソソーム内miRNAはマイクロアレイ解析を行い大腸腫瘍エクソソームに含まれる候補miRNAを選出した。さらに大腸腫瘍に対してESDを行った患者で治療前後の血清エクソソームmiRNAをRT-PCRで定量し比較検討した。大腸早期腫瘍オルガノイド培養上清中のエクソソーム内miRNAにおいて複数のmirの発現亢進が認められた。これらのmirを候補にして、ESD治療前後の血清エクソソームmiRNAではESD後で特定のmirの発現が低下する傾向が認められた。オルガノイド培養から抽出したmicroRNAのプロファイルと、血清エクソソームから抽出したmirのプロファイルを比較し、新たなリキッドバイオプシー候補microRNAを選出している。まだ少数例の検討であり今後さらに症例数を増やして検討する方針である。大腸腫瘍は現在良性腫瘍、早期癌を対象としていたが、進行癌症例の血清も収集する予定である。
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Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
大腸組織のオルガノイド培養技術は過去の研究で取得しており、本研究でも問題なく培養可能であった。臨床検体の収集が予定通り可能であり、研究進行状況はおおむね予定通りである。
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Strategy for Future Research Activity |
臨床検体をさらに収集し、候補mirの絞り込みや機能解析まで行う予定である。
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Causes of Carryover |
研究は順調にすすんでおり、来年度にむけてごくわずかな金額であるが次年度使用分にまわすことができた。
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