2020 Fiscal Year Annual Research Report
The role of alternative-autophagy related proteins in pathophysiology of colitis .
| Project/Area Number |
19K17426
|
|---|
| Research Institution | Tokyo Medical and Dental University |
|---|
Principal Investigator |
仁部 洋一 東京医科歯科大学, 難治疾患研究所, 助教 (30793351)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2019-04-01 – 2021-03-31
|
| Keywords | オートファジー / 腸炎 / ユビキチン |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
オートファジーは、細胞内の構成成分をバルクに分解する機構と考えられてきたが、最近の研究では、より選択的に基質を標識し分解する精緻な機序が明らかとなってきている。新規オートファジーは、既知のオートファジーの分子機構とは全く異なる分解機構である。申請者らの研究室においては、新規オートファジーに関連するユビキチンリガーゼとしてTRIM31を同定しており、本研究においては、この分子の腸管上皮における機能解析を行った。
まず、新規オートファジーで分解される基質の標識分子として、ユビキチンが関係していることを確認した。新規オートファジーで分解される基質を免疫沈降し、Western Blotで解析すると、ユビキチン鎖が結合していることが観察された。また、ユビキチン鎖を認識し、オートファジーへ誘導するアダプター分子候補Xを同定した。
次に、研究室で樹立したTrim31欠損マウスにおいて、DSS腸炎が増悪することを確認した。さらに、Trim31欠損マウスから、小腸上皮オルガノイドを作成し、種々のPathwayの異常を検討した。結果的に、LPS刺激下でのIkbαの分解遅延が示唆された。この経路において、Trim31でユビキチン化され、新規オートファジーで分解される分子の蓄積が、腸炎の病態形成に関与している可能性が考えられた。
さらに、申請者らの研究室で開発したオートファジーを染色する化合物を用い、Live imagingによる腸管上皮オルガノイドのオートファジー 察系を創出した。これを利用して、Trim31欠損小腸オルガノイドを解析すると、オートファジーの異常が示された。以上の結果から、DSS腸炎の増悪メカニズムとして、ユビキチンリガーゼTrim31の機能不全による、新規オートファジーの異常と、分解されるべき基質の蓄積が関与する可能性が考えられた。
|
Research Products
(2 results)
