脊髄におけるグレリンの大腸運動亢進作用機構の解明

2022 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 19K17492
• Research Institution: Okayama University
• Principal Investigator: 平山 晴子 岡山大学, 自然生命科学研究支援センター, 助教 (40635257)
• Project Period (FY): 2019-04-01 – 2024-03-31
• Keywords: 消化管 / グレリン / 大腸運動 / 脊髄

Outline of Annual Research Achievements

グレリンは、脊髄腰仙髄部の排便中枢への投与により、大腸運動を亢進することが明らかになっている。しかし、このグレリンの大腸運動亢進作用については、主にin vivoの実験系によって現象としてとらえられているのみであり、その詳細なメカニズムについては不明である。本研究の目的は、この大腸運動亢進作用について、その作用経路や作用機序について詳細を解明することである。2022年度は、前年度に引き続き以下の実験を行った。
（１）麻酔下ラットを用い、グレリンを脊髄腔内に投与した際の大腸内圧を測定することにより、作用部位の詳細な特定を行った。得られた結果をもとに、今後は形態学的検索についても拡げていく予定である。
（２）麻酔下ラットの骨盤神経に電極を留置し、グレリンの脊髄投与時における骨盤神経の複合活動電位記録を試みている。グレリン投与時の反応についてはまだ記録ができていないが、手技の確立・安定化に向け例数を重ね、解析方法の検討を行った。
（３）前年度は新生ラットを用い、神経標識色素を腹腔内投与することにより腹腔内臓器支配神経を逆行性に標識した上で脊髄スライス標本を作製しパッチクランプ法により神経活動記録を行った。当該年度の実験においては、4－5週齢のラットの骨盤神経節に標識色素を注入し、逆行性に脊髄の神経細胞をあらかじめ標識しておき、作製したスライス標本よりパッチクランプ法にて神経活動を記録する実験を行なった。神経活動記録については未だ成功していないが、色素投与により脊髄の神経細胞が標識されることが確認できた。次年度も引き続き実験を行い確定的なデータを得ることを目的とする。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

実験手技の確立および条件設定に時間がかかっており、進捗が遅れている。

Strategy for Future Research Activity

大腸の作用部位については、これまでに得られた結果を形態学的検索につなげ、逆行性神経標識色素の投与などを行う。骨盤神経活動記録については、今後例数を重ね、グレリン投与時の応答を記録する。またパッチクランプ法を用いた実験では、骨盤神経節への色素投与により逆行性に脊髄神経を標識する方法を習得し、データを得ることを目標とする。これらの実験と並行し、これまでに得られている結果をまとめ、学会発表および論文投稿を目指したいと考えている。

Causes of Carryover

当該年度に、実験が予定どおり進まなかったため、残額が生じた。予定していた実験について次年度に実施するため、当該の費用として支出する予定である。