ｓEH阻害ワクチンによる循環器病の治療法の開発

2020 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 19K17569
• Research Institution: Saga University
• Principal Investigator: 白木 綾 佐賀大学, 医学部, 寄附講座教授 (50638252)
• Project Period (FY): 2019-04-01 – 2023-03-31
• Keywords: 可溶性エポキシドハイドロレース / ワクチン

Outline of Annual Research Achievements

【心筋梗塞モデルラットについて】ワクチン①群Ｎ＝40、コントロール群Ｎ＝30について心筋梗塞モデルを作成し、結果を比較した。心筋梗塞後１週間での心機能（心拡大の程度、心収縮力）はワクチン群で改善しており、詳細な組織学的な検討では梗塞境界域での血管の増生を伴っていた。これらのラットの血液を用いて、ｓＥＨ阻害効果がある中和抗体ができているかどうかを質量分析にて確認したところ、ワクチン①群のラットの血液中の抗体はｓＥＨを阻害し、ＥＥＴ－ｄ11をＤＨＥＴ－ｄ11に分解するのを抑制する効果があることが分かった。引き続き、可溶性エポキシドハイドロレースの別の部分のペプチドを認識するワクチン②についても同様にｓEH阻害効果が得られるかどうかを現在検討中であるが、おおむねワクチン①と同様の結果が得られている。以上の結果をもとに、現在ｓＥＨ阻害ワクチンの製剤化をめざし、国内特許の申請手続きを行っている。

【心不全モデルについて】ワクチン①を拡張型心筋症モデルマウス（50％生存が平均17週齢である短命マウス）に投与し、慢性心不全に効果があるかどうかを検討した。結果としては、心拡大の程度や心機能に有意差はなかったが、生命予後において、やや改善傾向を認めた。このモデルはワクチン投与後、充分に抗体価が上昇するより先に寿命を迎えるため、今回のワクチンではこれ以上の検討は困難と判断した。そのため、心不全ハムスター（50％生存が平均３７週齢である短命ハムスター）にモデルを変更し、ワクチンが心不全に効果があるかどうか検討することにした。まず健常ハムスターにワクチンを投与し、抗ｓＥＨ抗体ができるかどうか確認したところ、充分な抗体価の上昇を認めた。現在、心不全ハムスターにワクチンを投与し、心機能や生命予後の変化を確認する実験が進行中である。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

心筋梗塞ラットにおいて、ワクチンによる改善効果を認め、またこのワクチンによって得られる抗体がｓEH阻害効果があることも質量分析により証明できた。心不全に効果があるかどうかの命題についても、実験を開始し、現在検討中である。

Strategy for Future Research Activity

今後はラットの心筋梗塞モデルにおいて、長期成績を確認していく必要がある。
また、製剤化を考えると、ワクチンは①と②の二種類があるが、そのシークエンスはヒト可溶性エポキシドハイドロレースとの相同性に少し違いがあることから、ヒトへの効果を vitroで検証していくことが必要である。
さらに、ハムスターでは可溶性エポキシドハイドロレースの力価が強いことがこれまでの実験で予想されており、ワクチンで得られた抗体が蛋白阻害効果があるかどうかの実験を調整する必要がある。

Causes of Carryover

新型コロナウイルス流行のため、旅費は使用しなかった。来年度も学会出張が困難な場合は実験に使用する消耗品に充てる。