2021 Fiscal Year Research-status Report
ヒトCD25刺激によるヒト化マウスを用いた新規間質性肺炎モデルの病態解明
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19K17641
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| Research Institution | Nagoya City University |
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Principal Investigator |
爲近 真也 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(医学), 助教 (00638603)
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| Project Period (FY) |
2019-04-01 – 2023-03-31
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| Keywords | ヒト化マウス / 間質性肺炎 / 急性肺障害 / CD25 / 炎症性サイトカイン / デキサメタゾン |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究では、ヒト化マウスにヒトCD25(hCD25)を刺激をすることで急性に間質性肺炎(IP)が生じるモデルマウスを用いて、hCD25刺激により急性に生じるヒトIP病態の解明を行うことが目的である。hCD25刺激のために、ヒトIL-2（hIL-2）と抗hIL-2抗体(clone 5344)によるhIL-2 complex（hIL-2cx）を使用した。
前年度は、NOGマウスにヒト末梢血単核球(hPBMC)を静注後、day7にPBS、hIL-2cxを腹腔内に投与し、day 14に解剖し、脾臓と肺のhPBMCの解析を行った。hIL-2cxによるhCD25刺激にも関わらず、肺ではhCD25陽性細胞の浸潤は少なく、ヒト制御性T細胞は認めなかった。またhIL-2cx刺激にて、脾臓のみならず、肺にもhIFN-γ、hTNF-αなどのヒト炎症性サイトカイン産生T細胞を認めた。
本年度は、肺に浸潤するhCD4+T細胞、hCD8+T細胞のヒト炎症性サイトカインの産生に関して、詳細に検討した。またデキサメタゾン(Dex) 5mg/kg/日をday 9-13まで腹腔内に投与し、NOGマウスの急性肺障害に対する影響を検討した。
その結果、hIL-2cxにより、肺に浸潤するhCD4+T細胞でのhIFN-γ、hIL-4、hTNF-αの産生、hCD8+T細胞でのhIFN-γ、GM-CSFの産生の有意な増加を認めた。またhIFN-γ、hTNF-α、hGM-CSFの3つのサイトカインを同時産生するhCD4+T細胞・hCD8+T細胞の有意な増加を認めた。これらのサイトカイン産生は、Dexにより有意な改善を認めなかった。さらに、PBSと比べて、hIL-2cxにより有意にヒト化マウスの生存率の低下や、day 14での肺病理にて肺炎増悪を認めたが、どちらもDex投与では有意な改善を認めなかった。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
本研究では、ヒトPBMCをNOGマウスに移入後、ヒトIL-2（hIL-2）と抗ヒトIL-2抗体(clone 5344)によるヒトIL-2 complex（hIL-2cx）を投与し、その後、間質性肺炎（IP）が生じたマウス肺に浸潤した細胞をFACSや病理にて討することで、ヒトCD25刺激により急性に生じるヒトIP病態の解明を行うことを目的としている。
本年度は、PBS、hIL-2cxのヒト化マウスの肺における影響や、ステロイドであるデキサメタゾン（Dex）追加の効果の検討をしたが、解析に時間がかかったため、少し予定よりも遅れてしまった。
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| Strategy for Future Research Activity |
次年度は、ヒトIL-2（hIL-2）と抗ヒトIL-2抗体(clone 5344)によるヒトIL-2 complex（hIL-2cx）により生じたヒト化マウスでの急性肺障害を、ステロイドであるデキサメタゾン(Dex)では抑えきることができないことが分かったため、ヒト炎症サイトカインをマルチに抑制可能なJAK阻害薬を追加し、肺における影響を、FACSや病理にて検討していく。
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| Causes of Carryover |
本研究では、ヒトPBMCをNOGマウスに移入後、ヒトIL-2（hIL-2）と抗ヒトIL-2抗体(clone 5344)によるヒトIL-2 complex（hIL-2cx）を投与し、その後、間質性肺炎（IP）が生じたマウス肺に浸潤した細胞をFACSや病理にて討することで、ヒトCD25刺激により急性に生じるヒトIP病態の解明を行うことを目的としている。
本年度は、PBS、hIL-2cxのヒト化マウスの肺における影響や、ステロイドであるデキサメタゾン（Dex）追加の効果の検討をしたが、解析に時間がかかったため、少し予定よりも遅れてしまったため、使用額が少なかった。
次年度は、hIL-2cxにより生じたヒト化マウスでの急性肺障害を、Dexでは抑えきることができないことが分かったため、ヒト炎症サイトカインをマルチに抑制可能なJAK阻害薬を追加し、肺における影響を、FACSや病理にて検討する予定のため、その解析に使用予定である。
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