メトトレキサート関連リンパ増殖性疾患の消退機序を関節リウマチ関連遺伝子から紐解く

2020 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 19K17845
• Research Institution: Japanese Foundation for Cancer Research
• Principal Investigator: 土橋 映仁 公益財団法人がん研究会, がん研究所 分子標的病理プロジェクト, 研究員 (40772249)
• Project Period (FY): 2019-04-01 – 2022-03-31
• Keywords: メトトレキサート関連リンパ増殖性疾患

Outline of Annual Research Achievements

メトトレキサート関連リンパ増殖性疾患 (MTX-LPD) は、MTX投与中の患者に発生するリンパ増殖性疾患である。LPDには、リンパ腫、反応性過形成、境界領域病変が含まれ、リンパ腫が臨床上問題となる。これまでにMTX-LPDの遺伝子網羅的な解析は行われておらず、MTX-LPDの自然消退機序の解明はされていない。そこで、化学療法が必要であった例とMTXの中止だけで寛解が得られた例の遺伝子網羅的な解析による比較を行った。
がん研有明病院にて生検、手術を行い、メトトレキサート関連リンパ増殖性疾患、または、その他の医原性免疫不全関連リンパ増殖性疾患と診断された患者41例のうち、検体が使用可能であった30例において、エクソームシーケンスを行った。また、リンパ腫組織型がDLBCLである検体を中心に、17例のRNAシーケンス、8例の全ゲノムバイサルファイトシーケンスを行った。さらに、共同研究機関より、38例の提供をいただき、追加でエクソームシーケンスを行った。これらの68例のエクソームシーケンスの中から、リンパ腫組織型がDLBCLである30例のエクソームシーケンスの結果を、化学療法が必要であった20例とMTXの中止のみで改善した10例で比較を行った。化学療法が必要であった群には、DLBCLを細分類する特徴的な遺伝子に変異が認められ、また、関節リウマチになりやすい遺伝子変異も認められた。
DLBCLを細分類する特徴的な遺伝子変異をより多くの症例で検討するため、FISH法や免疫染色で確かめることができる系を検討し、自験例で確認を行った。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

共同研究機関より、研究対象として用いることが可能である検体をすべて得た。また、共同研究機関の検体を含め、現時点で得られているすべての検体のエクソームシーケンスデータを得た。また、DLBCLを細分類する特徴的な遺伝子変異をより多くの症例で検討するため、ホルマリン固定パラフィン包埋切片でも用いることができる系を確立した。

Strategy for Future Research Activity

共同研究機関から得られた検体を含め、すべての検体からDNAを抽出し、エクソームシーケンスデータを得ている。今後は、このデータをもとに解析を深め、その結果をホルマリン固定パラフィン包埋切片でも確認できる系を用いて、さらに多くの症例で検証する予定である。

Causes of Carryover

エクソームシーケンスにて検出された変異をホルマリン固定パラフィン包埋切片でも確認が可能な系を開発し、さらに多くの検体で検討を行う方針としたため。