メトトレキサート関連リンパ増殖性疾患の消退機序を関節リウマチ関連遺伝子から紐解く

2022 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 19K17845
• Research Institution: Japanese Foundation for Cancer Research
• Principal Investigator: 土橋 映仁 公益財団法人がん研究会, がん研究所 分子標的病理プロジェクト, 研究員 (40772249)
• Project Period (FY): 2019-04-01 – 2024-03-31
• Keywords: メトトレキサート関連リンパ増殖性疾患 / 関節リウマチ

Outline of Annual Research Achievements

メトトレキサート関連リンパ増殖性疾患 (MTX-LPD) は、MTX投与中の患者に発生するリンパ増殖性疾患である。LPDには、リンパ腫、反応性過形成、境界領域病変が含まれ、リンパ腫が臨床上問題となる。これまでにMTX-LPDの遺伝子網羅的な解析は行われておらず、MTX-LPDの自然消退機序の解明はされていない。そこで、化学療法が必要であった例とMTXの中止だけで寛解が得られた例の遺伝子網羅的な解析による比較を行った。
がん研有明病院にて生検、手術を行い、メトトレキサート関連リンパ増殖性疾患、または、その他の医原性免疫不全関連リンパ増殖性疾患と診断された患者41例のうち、検体が使用可能であった30例において、エクソームシーケンスを行った。また、リンパ腫組織型がDLBCLである検体を中心に、17例のRNAシーケンス、8例の全ゲノムバイサルファイトシーケンスを行った。さらに、共同研究機関より、38例の提供をいただき、追加でエクソームシーケンスを行った。これらの68例のエクソームシーケンスの中から、リンパ腫組織型がDLBCLである30例のエクソームシーケンスにさらに10例を新たに加え、化学療法が必要であった群とMTXの中止のみで改善した群で比較を行った。化学療法が必要であった群には、DLBCLを細分類する特徴的な遺伝子に変異が認められ、また、関節リウマチになりやすい遺伝子変異も認められた。
DLBCLを細分類する特徴的な遺伝子変異をより多くの症例で検討するため、FISH法や免疫染色で確かめることができる系を検討し、自験例で確認を行ったが、再現性に乏しかったため、ホルマリン固定パラフィン包埋切片 (FFPE)症例を22例追加して、検出された特徴の検証を行っている。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

DLBCLを細分類する特徴的な遺伝子変異をより多くの症例で検討するため、ホルマリン固定パラフィン包埋切片 (FFPE) でも用いることができる系を確立した。そこで、共同研究機関も含め、22例のFFPEのみ利用できる検体を追加し、エクソームシーケンスデータを得て、解析を進めている。

Strategy for Future Research Activity

これまでに得られたエクソームシーケンスデータを比較検討し、得られた結果を、サンガーシーケンス、FISH法、免疫染色などで、検証する予定である。

Causes of Carryover

ホルマリン固定パラフィン包埋切片由来の検体を用いて、エクソームシーケンスを行い、データを得た。次年度は、この結果の検証や成果報告のために使用する予定である。