PPARgの新規転写共役因子SFPQ/PSFの脂肪細胞の分化における役割

2021 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 19K17953
• Research Institution: Gunma University
• Principal Investigator: 土岐 明子 群馬大学, 大学院保健学研究科, 助教 (30733935)
• Project Period (FY): 2019-04-01 – 2023-03-31
• Keywords: RNAスプライシング

Outline of Annual Research Achievements

これまでに申請者らは3T3-L1前駆脂肪細胞を用いて、splicing factor proline/glutamine-rich (SFPQ/PSF)にかかわる転写因子群について検討を行ってきた。
SFPQ/PSFをノックダウンすると白色脂肪細胞分化が抑制されることが判明している。electroporation法によってSfpq/Psf特異的small interfering RNAを3T3-L1前駆脂肪細胞に導入した。その後白色脂肪細胞への分化を誘導し、白色脂肪細胞分化早期あるいは分化後期の転写因子群において、Sfpq/Psfのノックダウンによる変化を検討した。白色脂肪細胞分化早期に誘導される因子群としてCebpb, Cebpd, Krox20などが知られており、Sfpq/Psfをノックダウンすることでこれらの因子群の遺伝子発現が減少することが定量的PCRで示された。また、分化後期に誘導される因子であるPparg, Cebpa, Fabp4についても遺伝子発現が抑制された。これまでの成果についてまとめた論文をBBRCに投稿し2022年6月に発表した。
これまでの既報ではmRNAスプライシングやそれにかかわる因子群との連携についても報告されている。今後はSfpq/Psfをノックダウンした場合のエクソンの変化を検討することとした。siRNAによりSfpq/Psfノックダウンを行い、得られた検体についてエクソン解析を実施した。コントロールと比較して、スプライシングに変化のある複数の脂肪代謝に関連する分子を同定した。これらの分子についてデータベースと照らし合わせ、脂肪細胞分化を調整する因子に関連するか、またその調節機構がスプライシングの違いによって変化するか、検討中である。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

コロナ禍において、家族の感染や自宅待機を経験し、これまで予定していた通りの研究が困難であった。

Strategy for Future Research Activity

Sfpq/Psfによりスプライシングが制御され、さらにそのアイソフォームが脂肪細胞分化に重要と思われる分子について、個別の検討を行う。定量的PCRをもちいて、実際にアイソフォームが変化していることを確認する。続いて該当スプライシング領域の機能の検討を行う。さらにSfpqがスプライシングに変化を及ぼすこと、またどのような因子と関連して脂肪細胞分化に関与するかを検討する。

Causes of Carryover

エクソン解析のサンプル調整の問題でnが予定よりも少なかったため、解析費用も予定よりも低額となった。今後はn数を増やして再解析を検討する。

Research Products

• [Journal Article] SFPQ associated with a co-activator for PPARγ, HELZ2, regulates key nuclear factors for adipocyte differentiation (2021)
  • Author(s): AkikoKatano-Toki, Satoshi Yoshino, Yasuyo Nakajima,TakuyaTomaru, Ayaka Nishikido, Emi Ishida, Kazuhiko Horiguchi, Tsugumichi Saito, Atsushi Ozawa, Tetsurou Satoh, Masanobu Yamada
  • Journal Title: Biochemical and Biophysical Research Communications Volume: 562 Pages: 139-145
  • Peer Reviewed / Open Access