増殖因子受容体経路を標的としたホルモン療法抵抗性乳癌に対する革新的治療薬の開発

2020 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 19K18065
• Research Institution: Nagoya City University
• Principal Investigator: 久田 知可 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(医学), 助教 (30781835)
• Project Period (FY): 2019-04-01 – 2022-03-31
• Keywords: 乳癌 / RIN1

Outline of Annual Research Achievements

私たちは、これまでに予備実験として行った研究から、RIN1遺伝子の発現低下がER陽性乳癌の予後不良因子であることを発見した。本研究は、癌遺伝子である Rasに関与するRIN1が、ER陽性乳癌において増殖因子受容体をエンドサイトーシスすることで細胞増殖抑制に関与し、ホルモン療法の抵抗性と関与していることを突き止める。それを踏まえて、最終的にRIN1を標的とした治療薬を開発することを目的とする。当該年度では、前年度に行ったにTaqMan RT-PCR システムを用いた約500例の乳癌組織の凍結標本からRNAを抽出しRIN1遺伝子のｍRNA発現と臨床病理学的因子と乳癌治療後の予後の検討をさらに、検討症例数を増やした。本年度は約300例の乳癌症例を追加の対象とし、臨床病理学的因子/予後の追跡が可能な症例を抽出し、前年度の症例と合わせて全610例を解析した。Kaplan-Meireによる解析では、全症例においてRIN1遺伝子の高発現を認めた乳がん症例 は、Disease-free survival (DFS)が良好であり、Breast-cancer specific survival（BCSS) 、Overall survival（OS) においてもも優位に良好であることを確認した。さらに、サブ解析として、ER陽性乳癌における同様の検討では、、DFSにおいては有意な差を認めないものの、RIN1遺伝子の高発現の症例は、予後良好な傾向を示し、BCSS、OSは有意な差をもって予後良好であることが示された。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

理由 当該年度には、乳癌組織検体を用いたRIN1遺伝子発現等の解析を追加で380例行った。本来行うべきであったエストロゲン受容体陽性または陰性乳癌細胞株によるRIN1遺伝子強制発現およびRIN1遺伝子ノックダウンの薬剤効果への影響に関する検討を施行することができていないため、当初の計画より遅れている

Strategy for Future Research Activity

乳癌細胞株に対するRIN1遺伝子強制発現およびRIN1遺伝子ノックダウンによる影響を、当初の計画になぞらえて試行していく。特にRIN1の下流遺伝子発現およびEMT関連遺伝子、 細胞遊走能・浸潤能、ホルモン療法の効果に焦点を絞って進める予定。Xenograftモデルを用いたin vivo研究では、ER陽性乳癌細胞株へのRIN1遺伝子発現ベクター導入やRIN1強制発現株とコントロールの親株をヌードマウスの皮下組織に植え付け、ホルモン療法の効果を比較検討予定である。

Causes of Carryover

コロナの影響で試薬が届かなく、実験が滞っため、次年度使用額が生じた。今後はこの使用額を調整しながら必要な試薬・細胞等の購入を予定する。