ADAMTS13関連因子を軸とした肝虚血再灌流障害に対する新規治療戦略

2020 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 19K18100
• Research Institution: Nara Medical University
• Principal Investigator: 吉川 高宏 奈良県立医科大学, 医学部附属病院, 研究員 (80773275)
• Project Period (FY): 2019-04-01 – 2022-03-31
• Keywords: 肝切除 / ADAMTS13

Outline of Annual Research Achievements

VWFは血管内皮細胞で産生され，UL-VWFマルチマーとして血中に放出される．一方で肝切除，特にPringle法による虚血再灌流障害の主要ターゲットが血管内皮細胞であることが知られている．
現在までの肝切除後のヒト血清を用いた検討では，ADAMTS13活性は術後有意に低下し（p<0.001）， VWF抗原量は術後有意に増加した（p<0.001）．UL-VWFMマルチマーは術前値0.2％（0.0-7.8）から術後7日目に4.2％（0.1-16.3）と有意に増加した（p<0.001）．多変量解析では，Pringle時間が術後UL-VWFマルチマー出現に関する独立した規定因子であった（p=0.043）．さらにUL-VWFマルチマーindexは，Pringle時間と正の相関を示した（r=0.444，p=0.017）．以上の結果から，UL-VWFマルチマーとPringle法による虚血再灌流障害との関連が示唆された．

Pringle法による虚血再灌流障害が病的血栓の原因とされるUL-VWFマルチマーを増悪させる因子であるとの観点から，実際の肝切除法に近いモデルを作成．C57BL/6J雄生8週齢マウスにおいて，全肝流入血遮断下（遮断時間30分）に30%肝切除を行う．Pringle法による影響を調べるために，Pringleなしの30%肝切除のみを行うグループも作成し，さらに術後にrecombinant ADAMTS13投与を行う群と投与しない群に分け，切除前後のADAMTS13活性，VWF抗原，UL-VWFマルチマー発現，GOT,GPT, T-Bil値を測定するとともに，肝における微小循環を組織学的に検証し，術中Pringle法による虚血再灌流障害に対するADAMTS13補充の治療効果を検討した．

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

ヒトの肝切除におけるADAMTS13関連因子の動態はすでに解析された．今後は，マウスを用いてrecombinant ADAMTS13の肝保護効果を検証する予定である．

Strategy for Future Research Activity

今後はin vivoの研究に移る予定である．具体的には，野生型及びADAMTS13ノックアウトマウスを用い，肝部分虚血モデルを作成する．末梢血及び肝組織を採取し，肝における虚血再灌流障害とADAMTS13活性 ・VWF抗原量・UL-VWFMsとの関連メカニズムを組織学的に検証する．
肝における虚血再灌流障害が立証されれば，recombinant ADAMTS13補充の治療効果を検討する予定である