生体肝移植術後の血栓性微小血管障害症の病態解明とグラフト肝機能の改善を目指して

2019 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 19K18111
• Research Institution: Mie University
• Principal Investigator: 種村 彰洋 三重大学, 医学系研究科, 講師 (80626242)
• Project Period (FY): 2019-04-01 – 2023-03-31
• Keywords: 血栓性微小血管障害症 / TMA / ADAMTS13 / 血小板

Outline of Annual Research Achievements

動物実験に先立ち、肝移植を行った症例についての血小板の推移、von Willebrand factor (vWF)、A disintegrin and metalloprotease with thrombospondin type I domain 13 (ADAMTS13)との関係について再度臨床データの見直しを行った。術後7日目までは血小板値は10万以下となる症例が多く、また血小板値が低い症例ほど周術期死亡が多い結果であった。一方で微小血管内でvon Willebrand factor (vWF)が血小板と重合体を形成することで微小血栓が生じ、臓器障害へと至ると言われており、vWFについても術後の推移を見てみると、上昇が認められた。さらにvWFの切断酵素であるADAMTS13については術直後から低下が認められていた。つまり、肝移植後は多くの症例で血栓性微小血管障害症(thrombotic microangiopathy: TMA)が起こっていると考えられる。
一方、ラットを用いた実験において上記現象の再現、現象の解明を行うため、まずはモデルの作成にとりかかっている。移植モデルを行う前段階として、肝虚血再灌流モデルを試みている。特に部分肝移植モデルを想定したモデルとして、70%肝切除を行ったのちに虚血再灌流(IRI)を行うモデルを作成中である。IRIの時間を変化させ、肝障害の度合いを調べるとともに、致死的とならない限界の時間としては20分が妥当と思われた。IRI後の組織学的変化を観察したところ、個体にばらつきはあるものの、類洞の拡張、局所的な壊死などが観察されたものの、血栓の評価については困難であった。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

臨床データでの肝移植後TMAの存在と、その際の血小板、vWF, ADAMTS13の動態についてはおおかたの把握ができた。現在はIRIのモデル作成に取り掛かっているところであるが、モデルの安定的な作成に時間を要している。また、必要なアッセイについても取り掛かり始めたところであり、今後、データの安定的な測定にも手技の習熟が必要であると思われる。

Strategy for Future Research Activity

2020年度はIRIモデルの手技の安定化と、術後の血小板の推移、vWF, ADAMTS13値の変化について、ヒトでの所見と同様な動態を示すかどうかについて検討する。その上で、移植後の肝の組織学的変化、特に肝の微小循環である、類洞内の変化、類洞内皮障害、微小血栓の形成について観察することを目標とする。また、もしADAMTS13の低下によるTMAの病態が示唆されれば、遺伝子組み替えADAMTS13を投与することによる治療効果についても検討を行う予定である。
肝移植モデルについてはさらなる手術手技の修練が必要であり、次年度に行うことを目標とする。