Prognosis prediction after resection of colorectal cancer liver metastasis by telomere measurement in the preoperative liquid biopsy.

2019 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 19K18133
• Research Institution: Nippon Medical School
• Principal Investigator: 青木 悠人 日本医科大学, 医学部, 助教 (40763256)
• Project Period (FY): 2019-04-01 – 2023-03-31
• Keywords: テロメア長 / TERT活性 / PCR法 / 大腸癌肝転移

Outline of Annual Research Achievements

大腸癌肝転移の外科切除症例において、単発の小さな肝転移でも、早期に再発し不幸な転機をとる患者がいる一方で、多数の転移を認めても、手術で肝転移を取り除くことで、大腸癌が治癒する患者が存在する。しかし、術前より予後を予測することは困難である。本研究は肝転移切除術後の予後を予測するために、癌細胞のテロメア長やテロメレース活性が利用できないかを検討し、さらにliquid biopsyへの応用に挑戦するものである。
実施初年度は大腸がん肝転移症切除例の切除標本検体・採血サンプルを収集を開始した。
切除標本を用いたものとしては、予備実験として既存の切除標本サンプルからPCR法にてテロメア長およびTERT活性を測定する予備実験を行い、測定方法をほぼ確立しつつある。今後、新たに集積したサンプルを用い解析を順次進めていく予定にしている。
また、liquid biopsyでのテロメア長ならびにTERT活性に関しては、採血中より分離した血中遊離癌細胞に白血球がコンタミネーションしてしまうことが問題となるため、その精度を高める方法を模索中である。抽出効率を向上させる必要があるが、single cellでの測定の可能性なども含め模索している。
次年度以降は集積した切除標本サンプルの解析をすすめるとともに、さらなるサンプルの蓄積を進める予定である。また、liquid biopsyへの応用はコンタミネーションに対応する方法（精度の向上）を確立し次第実施していく予定としている。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

当初既存サンプルも利用することを計画していたが、既存サンプルで臨床データなど揃っているものを検索した結果、十分な症例数が得られなかった。既存サンプルで予備実験を行うことができたが、前向きに集積したサンプルを本実験では用いることとしたため、その集積に多少の時間を要する見込みである。

Strategy for Future Research Activity

今後は新規に集積したサンプルを用い、切除標本検体でのPCR法によるテロメア長・TERT活性の測定を行っていく。そのために、本年も更にサンプル集積を引き続き行う。また、採血を用いたliquid biopsyによる測定は、引き続きコンタミネーションの影響を排除する方法を模索し、測定方法を確立し次第初めて行きたい。

また2020年度より大学内で所属が移動（分院へ移動）となったため、サンプルを集積する方法（倫理委員会を含め）を改めて確立する必要がある。

Causes of Carryover

本年度は解析が予備実験に限られたため、試薬・材料の代金が見込みより少額であった。次年度は解析数が本年に行えなかったも分を含め予定より増加する見込みであり、支出額も増加する見込みである。