腹膜偽粘液腫の治療法の開発：ゲノム解析と患者由来がんモデルを用いたスクリーニング

2020 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 19K18136
• Research Institution: National Cancer Center Japan
• Principal Investigator: 野口 玲 国立研究開発法人国立がん研究センター, 研究所, 研究員 (30779682)
• Project Period (FY): 2019-04-01 – 2021-03-31
• Keywords: 腹膜偽粘液腫 / 患者由来がんモデル / RNA-Seq

Outline of Annual Research Achievements

本研究の目的は、希少がんである腹膜偽粘液腫に対する奏効性を有する抗がん剤を見つけることである。腹膜偽粘液腫は、標準治療はなく、外科的治療による原発巣の切除と粘液物質の除去およびマイトマイシンCの腹腔内灌流化学療法が効果的とされているが、腫瘍の完全切除は困難で，数年の経過で約40%が再発を繰り返す。希少であること、細胞株や実験動物などのモデル系がないため、基礎研究や前臨床試験を行うことが難しい。そのために、治療開発が停滞している。本研究は、既存薬剤の中から奏効性を有する抗がん剤を見つける「既存薬の適応拡大」を行う。具体的には「患者由来がんモデルを用いたスクリーニング」を行う。
入手したした腹膜偽粘液腫検体でHDRA法を行った。疾患の特徴である粘液分泌が過多なため、腫瘍が粘液にコーティングされており、組織に薬剤や培地などがしみこまないという問題が起き、HDRA法を腹膜偽粘液腫で行うのは難しいと判断した。同時に行っていた患者由来がんモデルである初代培養細胞株の作製を行った。方法として酵素分散法、組織切片法など、培養の基質をマトリゲル、コラーゲンなどを試したが、線維芽細胞の増殖が速く、上皮細胞のみを培養することは難しかった。最終的にセルソーターを用いて腫瘍組織から上皮細胞のみ回収し、回収した上皮細胞をマトリゲルとMEFでコートしたディッシュに播き、RNA-Seqの発現プロファイルをもとに作製した無血清培地で患者由来腹膜偽粘液腫細胞株を樹立することができた。現在、継代数を重ねており、樹立した細胞株を用いて、薬剤感受性試験を行う予定である。