Establishment of a new molecule therapy for the delayed bone union using miRNA inhibitors

2020 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 19K18368
• Research Institution: Nippon Medical School
• Principal Investigator: 原 義明 日本医科大学, 医学部, 講師 (20386197)
• Project Period (FY): 2019-04-01 – 2023-03-31
• Keywords: マイクロRNA / 骨癒合遷延 / Osteigenesis / Angiogenesis / Fibrogenesis

Outline of Annual Research Achievements

今年度はCOVID-19の蔓延により、研究室の出入りや業者との打ち合わせ、共同研究者との接触禁止と様々な制限が生じ、予定していた本格的な実験の始動が行えなかった。
この期間を利用して、統計処理の学習やmicroRNA研究の文献通読などを行い、研究デザインの再考や修正を行った。骨折作成機を新たに業者に作成依頼して、安定した骨折作成を行う準備期間とした。2021年に入り骨折作成機の試作品が完成したため、他の実験で使用後のSDラット死骸四肢を使って骨折作成の修練を行った。また、骨癒合の完成の有無を確認する動物用CTの操作を習熟し、自裁にSD ラットを用いて撮影して解析する訓練も行った。
2021年5月より本格的な骨折ラット作成を計画しており、骨癒合遷延モデル５匹、骨癒合モデル５匹を作成し、骨折前、１週間後、２週間後、４週間後、６週間後の５ポイントで採血（０．６-１．０ml）を行い、その血漿を遠沈回収して-８０度で冷凍保存することとしている。検体が５０検体（各群５匹５ポイント）集まったところで、網羅的なmicro RNA発現の動向を２ポイント（骨折前と骨折２週後）検索し、ターゲットとなるOsteigenesis、Angiogenesis、Fibrogenesisに関与する変動micrRNAを同定し、経時的な定量を行う。同時にターゲットmicrRNAの関与するタンパク合成の増減もERISA法にて測定し確認する。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

今年度はCOVID-19の蔓延により、研究室の出入りや業者との打ち合わせ、共同研究者との接触禁止と様々な制限が生じ、予定していた本格的な実験の始動が行えなかった。

Strategy for Future Research Activity

2021年5月より本格的な骨折ラット作成を計画しており、骨癒合遷延モデル５匹、骨癒合モデル５匹を作成し、骨折前、１週間後、２週間後、４週間後、６週間後の５ポイントで採血（０．６-１．０ml）を行い、その血漿を遠沈回収して-８０度で冷凍保存することとしている。検体が５０検体集まったところで、網羅的なmicro RNA発現の動向を検索し、ターゲットとなるOsteigenesis、Angiogenesis、Fibrogenesisに関与する変動micrRNAを同定し、経時的な定量を行う。同時にターゲットmicrRNAの関与するタンパク合成の増減もERISA法にて測定し確認する。

Causes of Carryover

2021年5月より本格的な骨折ラット作成を計画しており、骨癒合遷延モデル５匹、骨癒合モデル５匹を作成し、骨折前、１週間後、２週間後、４週間後、６週間後の５ポイントで採血（０．６-１．０ml）を行い、検体が５０検体集まったところで、網羅的なmicro RNA発現の動向を検索し、ターゲットとなるOsteigenesis、Angiogenesis、Fibrogenesisに関与する変動micrRNAを同定し、経時的な定量を行う。同時にターゲットmicrRNAの関与するタンパク合成の増減もERISA法にて測定し確認する。