子宮頸部上皮内病変の細胞極性蛋白発現異常症例に対するBCG療法の有用性検討

2020 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 19K18647
• Research Institution: Yokohama City University
• Principal Investigator: 水島 大一 横浜市立大学, 医学部, 助教 (80835059)
• Project Period (FY): 2019-04-01 – 2022-03-31
• Keywords: 子宮頸部上皮腫瘍 / 免疫療法 / 婦人科腫瘍 / BCG

Outline of Annual Research Achievements

子宮頸部上皮腫瘍（CIN）は子宮頸がんの前駆病変で、確立した治療方法は手術のみである。進行して浸潤がんになるまで年単位の時間がかかり、逆に経過観察中に自然消退する可能性もある。これまで、病変の程度や感染したヒトパピローマウイルスの型により、浸潤癌への進行リスクを分類してきたが、長期間の経過観察が必要な実態があり、病気の転機や自然治癒を予測するバイオマーカーの開発や、内科的な治療法開発が求められている。CINの病変進行に細胞極性蛋白aPKCの発現異常が関与する可能性に注目し、aPKCの発現異常とCIN進行の関連を前向き観察研究で検証している。
1）CIN進行の予測に関する前向き観察研究： 初回診断されたCIN1/2を対象とし、診断時の初回生体のHE染色、aPKC発現、HPVのタイピングで層別化し、病変の進行をカプランマイヤー法と多量解析で評価している。現在の登録の中間解析を行い、単変量解析では、aPKCの異常発現と病変の進行の関連が示されている。
2）子宮頸部不死化扁平上皮を用いて、CINの治療標的分子の候補を検討しているが、がん化を評価するモデル樹立が困難であり、浸潤癌細胞で浸潤能の解析を行う方針に切り替えた。
3）aPKCによる浸潤能の機序解明：子宮頸がん細胞株を用い、aPKC過剰発現のノックダウンを行ったが、表現型（浸潤能力・増殖能力・腫瘍形成能力）に差を認めなかった。
そこで、核局在型のaPKC変異体を細胞株に強制発現すると、細胞の増殖能力に変化は認めないものの、細胞の浸潤能力が増強した。そこで、aPKCの核局在型と正常局在型、aPKCノックダウンと対照細胞の遺伝子発現を、それぞれマイクロアレイで発現の比較を行った。浸潤能力に関連する遺伝子を候補を数個にしぼり、候補遺伝子が浸潤能力に関連するか、メカニズムの解析を続けている。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

1）前向き観察研究：臨床研究としての新規登録数が減少しているため登録が遅れている。

2）aPKCによる浸潤能の機序解明：不死化細胞を用いた実験系の樹立を試みたが、困難であり浸潤癌細胞を用いた実験に切替えた。

3)コロナウイルス蔓延による社会的活動の制限により、やや進捗が遅延した

Strategy for Future Research Activity

1）CIN前向き観察研究で一定の症例数に達したため、中間解析を行っている。その結果に応じて症例の必要数について妥当性を検討する。

2）不死化細胞を用いた実験系の樹立が困難であるため、浸潤癌細胞を用いた実験に切替えて解析を進め、同様の現象がＣＩＮでも生じているか、手術サンプルを免疫組織科学的に解析する方法を検討している。

Causes of Carryover

コロナウイルス蔓延による社会的活動の制限により、やや進捗が遅延したため支出も減少した。