卵巣癌の小分子RNA－mRNAネットワークに基づく核酸医薬の実現

2020 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 19K18651
• Research Institution: Keio University
• Principal Investigator: 千代田 達幸 慶應義塾大学, 医学部(信濃町), 講師 (40445367)
• Project Period (FY): 2019-04-01 – 2022-03-31
• Keywords: 卵巣癌 / 小分子RNA / トランスクリプトーム / オルガノイド

Outline of Annual Research Achievements

2019年度に同定したmiR-497-5p-SMARCA4の卵巣漿液性癌におけるネットワークに関して解析を進めた。公共データベースを用いた解析において、miR-497-5pの発現高値は低値に比較して乳癌および肝臓癌において予後が良好であった（それぞれp<0.001, p<0.05）。続いてSMARCA4の卵巣漿液性癌における意義を明らかにする解析を行った。卵巣漿液性癌78例を用いて免疫組織化学染色を行い、SMARCA4の発現が高いほど全生存率（overall survival）が低い（p<0.05）ことが明らかとなった。TCGAデータベースの解析においてはSMARCA4は約20％の漿液性癌で発現上昇が認められており、遺伝性乳癌卵巣癌の原因遺伝子であるBRCA1、BRCA2の変異とは相互に排他的であった。卵巣癌細胞株（OVSAHO）のSMARCA4ノックダウン株を作成し、3次元でオルガノイド培養を行ったところ、ノックダウン株は増殖がやや低くなり、細胞周期の解析においてはSMARCA4ノックダウン株はG1期が延長し、G2M期の短縮が認められた。次にSMARCA4ノックダウン株とコントロール株のオルガノイドを用いてトランスクリプトーム解析を行った。SMARCA4ノックダウン株で同様に発現低下が認められる遺伝子としてBGNが抽出され、qPCRにおいてその妥当性を確認した。また、BRG1の強制発現によりBGNの発現は高値であることをqPCRおよびウエスタンブロッティングで確認した。公共データベースを用いた解析においてBGNの高発現は卵巣漿液性癌において有意に予後が悪かった（p<0.05）。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

SMARCA4強制発現株の作成を試みており、一過性ではSMARCA4の発現上昇が確認できるものの、セレクションによる安定な強制発現細胞株の作成はうまくいかず、時間がかかっている。

Strategy for Future Research Activity

SMARCA4とBGNの関係性を明らかにするため、ノックダウン株および強制発現株を用いた解析を進める。SMARCA4は細胞増殖に与える影響はこれまでの結果から強くないと考えられ、SMARCA4高発現が予後不良である原因としては抗腫瘍薬耐性である可能性が考えられる。幹細胞性などに影響があると考えられ、SMARCA4とBGNの幹細胞性に与える影響を既に得たトランスクリプトームのデータ、TCGAデータより明らかにする。

Causes of Carryover

研究の進捗が当初より遅れているため、研究期間を延長した。SMARCA4とBGNの関係性の確認と、既に行ったSMARCA4ノックダウン株のトランスクリプトームデータ、TCGAデータベースの解析により幹細胞性など予後不良となる原因を検索して論文にまとめる。

Research Products

• [Journal Article] Patient-derived ovarian cancer organoids capture the genomic profiles of primary tumours applicable for drug sensitivity and resistance testing (2020)
  • Author(s): Nanki Yoshiko、Chiyoda Tatsuyuki、Hirasawa Akira、Ookubo Aki、Itoh Manabu、Ueno Masaru、Akahane Tomoko、Kameyama Kaori、Yamagami Wataru、Kataoka Fumio、Aoki Daisuke
  • Journal Title: Scientific Reports Volume: 10 Pages: 1197
  • DOI: 10.1038/s41598-020-69488-9
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] A prospective cohort study on the safety and efficacy of bevacizumab combined with chemotherapy in Japanese patients with relapsed ovarian, fallopian tube or primary peritoneal cancer (2020)
  • Author(s): Nanki Yoshiko、Nomura Hiroyuki、Iwasa Naomi、Saotome Keiko、Dozen Ai、Yoshihama Tomoko、Hirano Takuro、Hashimoto Shiho、Chiyoda Tatsuyuki、Yamagami Wataru、Kataoka Fumio、Aoki Daisuke
  • Journal Title: Japanese Journal of Clinical Oncology Volume: 51 Pages: 54～59
  • DOI: 10.1093/jjco/hyaa140
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Lymphadenectomy for primary ovarian cancer: a systematic review and meta-analysis (2020)
  • Author(s): Chiyoda Tatsuyuki、Sakurai Manabu、Satoh Toyomi、Nagase Satoru、Mikami Mikio、Katabuchi Hidetaka、Aoki Daisuke
  • Journal Title: Journal of Gynecologic Oncology Volume: 31 Pages: e67
  • DOI: 10.3802/jgo.2020.31.e67
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Clinical implications of next‐generation sequencing‐based panel tests for malignant ovarian tumors (2020)
  • Author(s): Saotome Keiko、Chiyoda Tatsuyuki、Aimono Eriko、Nakamura Kohei、Tanishima Shigeki、Nohara Sachio、Okada Chihiro、Hayashi Hideyuki、Kuroda Yuka、Nomura Hiroyuki、Susumu Nobuyuki、Iwata Takashi、Yamagami Wataru、Kataoka Fumio、Nishihara Hiroshi、Aoki Daisuke
  • Journal Title: Cancer Medicine Volume: 9 Pages: 7407～7417
  • DOI: 10.1002/cam4.3383
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Uterine cervical cancer associated with obstructed hemivagina and ipsilateral renal agenesis (OHVIRA) syndrome: A case report and review of the literature (2020)
  • Author(s): Oka Emiko、Chiyoda Tatsuyuki、Iwata Takashi、Yamagami Wataru、Aoki Daisuke
  • Journal Title: Gynecologic Oncology Reports Volume: 34 Pages: 100645～100645
  • DOI: 10.1016/j.gore.2020.100645
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Presentation] Ovarian cancer organoids recapitulate genomic alterations of the parental tumors. (2020)
  • Author(s): 南木佳子, 千代田達幸, 平沢 晃, 吉村拓馬, 赤羽智子, 山上 亘, 青木大輔
  • Organizer: 第79回 日本癌学会学術集会
• [Presentation] 体腔液より作成したセルブロックを用いてがん遺伝子パネル検査を行った症例の検討 (2020)
  • Author(s): 吉浜智子, 千代田達幸, 中村康平, 四十物絵里子, 同前 愛, 平野卓朗, 黒田由香, 吉村拓馬, 小林佑介, 西尾 浩, 山上 亘, 青木大輔
  • Organizer: 第59回 日本臨床細胞学会秋期大会
• [Presentation] 再発卵巣癌のセカンドライン化学療法におけるリポソーマルドキソルビシン＋カルボプラチン療法（PLD-C）の有効性および安全性の検討 (2020)
  • Author(s): 王 洪欣, 千代田達幸, 黒田由香, 高橋美央, 吉村拓馬, 同前 愛, 平野卓朗, 山上 亘, 青木大輔
  • Organizer: 第140回 関東連合産科婦人科学会学術集会
• [Presentation] 卵巣境界悪性腫瘍に対する腹腔鏡下手術と開腹手術の比較検討 (2020)
  • Author(s): 同前 愛, 千代田達幸, 高橋美央, 黒田由香, 吉村拓馬, 平野卓朗, 山上 亘, 青木大輔
  • Organizer: 第60回 日本産科婦人科内視鏡学会
• [Presentation] 卵巣癌に対するBRCA1/2遺伝学的検査の適用, PARP阻害薬の適応, 効果, マネジメント (2020)
  • Author(s): 千代田達幸, 青木大輔
  • Organizer: 第26回 日本遺伝性腫瘍学会学術集会
  • Invited
• [Presentation] Copy number alterationカウントは卵巣悪性腫瘍において進行期分類と相関する (2020)
  • Author(s): 千代田達幸, 早乙女啓子, 四十物絵理子, 中村康平, 谷嶋茂樹, 野原祥夫, 岡田千尋, 吉村拓馬, 黒田由香, 山上 亘, 西原広史, 青木大輔
  • Organizer: 第58回 日本癌治療学会学術集会