2021 Fiscal Year Research-status Report
低ホスファターゼ症に対する新規胎児遺伝子治療の確立
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19K18970
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| Research Institution | Tokyo Dental College |
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Principal Investigator |
高橋 有希 東京歯科大学, 歯学部, 講師 (30778626)
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2019-04-01 – 2023-03-31
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| Keywords | 低ホスファターゼ症 / アデノ随伴ウイルスベクター / 遺伝子治療 / 先天性骨系統疾患 / アルカリホスファターゼ / 胎児治療 / 酵素補充療法 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
低ホスファターゼ症（hypophosphatasia, HPP）は硬組織の石灰化不全、呼吸困難、痙攣発作、乳歯の早期脱落を主徴とする遺伝性疾患である。本邦においては、致死性である周産期重症型や乳児型の頻度が高く、これらは胎児期に症状が進行し、死産または出生直後に死亡、あるいは出生した場合でも、重篤な呼吸機能不全を伴うことが一般的である。
現在、酵素補充療法が行われているが、治療開始時期が新生児期からであるため周産期重症型には対応できておらず、酵素の半減期の観点より、長期反復投与の必要があるため侵襲性が高い。そこで、これらの問題を解決するために行った、アデノ随伴ウイル（AAV）ベクターによる胎児治療実験において、単回投与での延命効果を得ることに成功した。
しかしながら、組織非特異的プロモーター制御であるため、AAVウイルスが導入されたすべての臓器で導入遺伝子が過剰発現し、予期せぬ副作用がおこる可能性がある。
したがって本研究課題では、筋特異的プロモーター制御下における胎児遺伝子治療の治療効果および安全性に関して検証することを目的としている。
2021年度は、2019年度に構築した筋特異的プロモーター制御下にeGFPを発現するAAVベクターを作製し、筋特異的発現が成されているかマウス筋芽細胞であるC2C12細胞および非筋肉細胞であるHEK293細胞、HeLa細胞に遺伝子導入を行い確認した。その結果、C2C12ではeGFPが発現したのに対し、その他の細胞では強発現は確認されなかった。この結果を受け、現在筋特異的プロモーター制御下に治療遺伝子である組織非特異的アルカリホスファターゼを発現するよう構築したAAVベクターを作製し、治療実験に移行している。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
新型コロナウイルス感染症の影響により、自宅待機をせざる得ない状況や実験に必要な試薬の納期が遅れる等の理由から当初の予定よりやや進行が遅れている。
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| Strategy for Future Research Activity |
2022年度は、2021年度に引き続きHPPモデルマウスを使用した胎児遺伝子治療実験を行い、出生直後および治療マウス90日齢、360日齢それぞれより、①出産
時および出産直後の状態の確認、②治療効果、③AAVベクター分布、④AAVベクター投与による呼吸機能、⑤行動量、⑥免疫反応および異所性石灰化の有無、を評価・解析することとする。そして、得られた大腿骨および顎骨サンプルを解析し、硬組織形成不全への治療効果を評価する。
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| Causes of Carryover |
残高3円なので、次年度研究費と合わせて物品費に充てようと考えている。
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