2021 Fiscal Year Annual Research Report
口腔がん悪性度に関与するDLEU1の作用機構の解明とその臨床応用
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19K19239
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| Research Institution | Sapporo Medical University |
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Principal Investigator |
畠中 柚衣 札幌医科大学, 医学部, 研究員 (60815265)
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| Project Period (FY) |
2019-04-01 – 2022-03-31
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| Keywords | 口腔がん / 長鎖noncoding RNA / DLEU1 / インターフェロン応答 / IFITM1 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
DLEU1の下流標的遺伝子を同定するために、DLEU1ノックダウン細胞におけるゲノムワイドなヒストン修飾を解析した。H3K4me3およびH3K27acをChIP-seqにより解析した結果、全RefSeq遺伝子の転写開始点近傍におけるH3K27acの低下が認められた。H3K27acの変動が大きかった上位300遺伝子を抽出しGene Ontology解析、Pathway解析を行ったところ、インターフェロンシグナル経路に関連する遺伝子がエンリッチしていた。
口腔がん細胞株における遺伝子発現をマイクロアレイ解析した結果、DLEU1ノックダウンにより複数のインターフェロン応答遺伝子(ISG)の発現量の低下が認められた。Gene Set Enrichment Analysisにおいて、DLEU1のノックダウンによってインターフェロンシグナル経路に関連する遺伝子セットの発現低下が認められた。次にDLEU1を過剰発現させた口腔がん細胞における遺伝子発現をマイクロアレイ解析した。DLEU1ノックダウン時に発現量が低下した遺伝子と過剰発現時に発現量が上昇した遺伝子に共通する遺伝子を抽出し、Pathway解析を行ったところ、インターフェロンα/βシグナル経路に関連する遺伝子が多く含まれていた。
またDLEU1のノックダウンによってインターフェロン受容体の発現量に変化が認められた。DLEU1をノックダウンしたOSCC細胞においてリン酸化STAT1の低下を認めた。DLEU1過剰発現によるJAK-STAT経路の活性化がルシフェラーゼレポーターアッセイにより確認された。
OSCC臨床検体において、ISGの一つであるIFITM1発現の上昇が認められ、IFITM1とDLEU1の発現量は正の相関を示した。IFITM1のノックダウンにより細胞増殖能、遊走・浸潤能の低下が認められた。これらの結果から、DLEU1は口腔がん細胞においてインターフェロンシグナル経路の制御に関わっており、IFITM1を含むISGの活性化を通してOSCC細胞の進展に関与すると考えられた。
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