2020 Fiscal Year Research-status Report

歯の形態形成における一次繊毛遺伝子と外的環境因子の関わり

Research Project

Project/Area Number	19K19305
Research Institution	Fukuoka Dental College
Principal Investigator	緒方佳代子福岡歯科大学, 口腔歯学部, 助教 (70830123)
Project Period (FY)	2019-04-01 – 2022-03-31
Keywords	MIH / MIM / 歯 / 石灰化 / 発生
Outline of Annual Research Achievements	Molar Incisor Hypomineralization（MIH）や Molar Incisor Malformation（MIM）は、第一大臼歯、切歯といった特定の歯種に限局した形成異常を生じる。しかしながら、これらの原因はいまだ明らかになっておらず、MIHやMIMといった形成異常を呈する歯は、成長発達期である小児においては健全な口腔機能の獲得に不利となる。本研究では培養細胞と実験動物を用いて、MIHとMIMの発症原因を遺伝的因子と環境因子の両方向から探索し、歯の形成への個々の影響とその相乗効果を検証することを目的とする。本年度は、in vivoの解析を中心に行った。同意取得後、保存不可能となり抜歯を行ったMIMの歯を用いて、マイクロCTおよび走査電子顕微鏡にて解析を行った。さらに、組織切片を作製しヘマトキシリン・エオジン染色（HE染色）、特殊染色、免疫組織化学染色により解析を行った。これらの解析より、先行論文同様、MIMに特徴的に現れる歯髄腔の異所性石灰化を確認することができた。動物実験においては所属施設の動物実験委員会の承認後、モデルマウス作製に取り組んでおり、マイクロCTおよびHE染色にて解析を行い、現在も継続中である。 in vitroの解析ではこれまで使用していたマウス歯乳頭由来細胞株（mDP細胞株）およびヒト乳歯歯髄由来間葉系細胞に加え、マウス頭部神経堤細胞株（O9-1細胞株）を用いて骨分化誘導、軟骨分化誘導とともに、薬剤添加を行いqRT-PCRにて骨分化、軟骨分化の評価を行っており、現在も継続中である。
Current Status of Research Progress	Current Status of Research Progress 2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned. Reason 抜去歯を用いた特殊染色や免疫組織化学染色によるタンパク発現解析やマイクロCT解析によりMIMの歯の解析を進めることができた。本年度のin vitro実験においては著明な進展はなかったが、マウスを用いた実験に取り掛かり、in vivo実験とin vitro実験により解析を進めることができている。
Strategy for Future Research Activity	現在行っているin vivo実験とin vitro実験の解析を進め、MIMの歯髄腔に認められる異所性石灰化の原因解明を中心に解析を進めていく。
Causes of Carryover	参加を予定していた学会がコロナウイルスの感染拡大によりオンライン開催となったため、その分の旅費が未使用となり次年度使用額が生じた。次年度使用額となる研究費は物品費および実験動物維持費として計上する。