2019 Fiscal Year Research-status Report
ＴＩＬ療法の限界を克服する～メトホルミンを用いた代謝調節によるＴ細胞若返りの試み
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19K22362
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
中川 貴之 東京大学, 大学院農学生命科学研究科(農学部), 准教授 (40447363)
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| Project Period (FY) |
2019-06-28 – 2021-03-31
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| Keywords | TIL / メトホルミン / T細胞リプログラミング |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究では、悪性腫瘍症例の手術検体より採材した腫瘍浸潤T細胞(TIL)を、体外で増幅後、症例に投与する腫瘍免疫療法(TIL療法)において、代謝調節薬によるT細胞のリプログラミング(若返り)を試み、TIL療法の治療効果の増強を目指す。まず、効率的なTIL採材のため、パラフィン包埋ブロックを用いて、様々な犬悪性腫瘍におけるT細胞浸潤量を検証した。T細胞浸潤量を評価するために、T細胞マーカー(抗CD3抗体)、細胞傷害性T細胞マーカー(抗CD8抗体)、T細胞の腫瘍傷害マーカー(抗Granzyme抗体)を用いて、免疫染色を行った結果、犬膀胱癌や犬乳腺癌、犬肛門嚢腺癌など、T細胞浸潤量が多くTIL療法の検証に最適ないくつかの腫瘍種の同定に成功した。これにより、次年度の症例犬のTILを用いた検証の体制が整った。さらに、TIL浸潤の多い犬膀胱癌における解析を進めたところ、犬膀胱癌腫瘍組織において、アミノ酸代謝を制御する分子Xの異常が高頻度に存在し、アミノ酸不均衡によるT細胞の老化が起きている可能性がわかってきた。これにより、メトホルミンに加えて、分子Xの阻害剤を用いたT細胞リプログラミングができる可能性でてきた。代謝調節薬や分子Xの阻害剤の作用をin vitro検証するために、実験犬の末梢血由来のT細胞を用いた評価系の確立にも取り組んできた。これまでに、犬末梢血由来単核球(PBMC)を効率的に増殖させるための、条件検討を行い、増殖サイトカインIL-2の最適濃度や刺激薬の種類と濃度の決定が終了した。これによって、in vitro実験により、代謝調節薬や分子Xの阻害剤の効果とその機序を検証する体制が整った。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
初年度、実験犬末梢血由来のT細胞や症例犬由来のTILを用いた薬剤の効果を検証するための、基礎的な検証が成功し、十分な準備体制が整った。さらに、T細胞リプログラミング効果の期待できる分子Xの阻害剤も新しい候補分子として、同定され、次年度の研究の発展が期待される。
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| Strategy for Future Research Activity |
初年度の解析により、同定された効率的なTIL採材が期待できる腫瘍種の犬症例から、TILを採材しTILの解析を進める。また、初年度に確立したプロトコルで作製した実験犬末梢血由来のT細胞を用いた解析を進める。代謝調節薬メトホルミンや分子Xの阻害剤のT細胞の増殖や寿命、メモリーマーカーの発現変化を、フローサイトメーターを用いた解析を中心に進める。変化を認めたら、RNAシークエンス解析やメタボローム解析により、関連遺伝子変化や代謝変化の詳細を明らかにし、その機序を解析する。
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