2021 Fiscal Year Annual Research Report
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19K22425
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
志賀 向子 大阪大学, 理学研究科, 教授 (90254383)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
濱中 良隆 大阪大学, 理学研究科, 助教 (10647572)
長谷部 政治 大阪大学, 理学研究科, 助教 (40802822)
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| Project Period (FY) |
2019-06-28 – 2022-03-31
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| Keywords | 光周性 / 概倍日リズム / ナミニクバエ / オオクロコガネ / 時計遺伝子 / PTTH |
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| Outline of Annual Research Achievements |
（時計ネットワークの同定）ナミニクバエ 環状腺からのバックフィルにより染色側とは反対側に染色される細胞をPTTH細胞として個別に回収しnested-PCRを実施した。その結果、グルタミン酸作動性Clチャネルが75％、sNPF受容体が45％、PDF受容体が30％の細胞に発現していた。グリシン受容体の発現は認められなかった。他種ハエのsLNvの伝達物質として知られているPDFとsNPFの受容体発現が一部に見られたことから、PTTH細胞はsLNvの入力を受けている可能性がある。ただし、発現率が少なかったことから、sLNvは他の伝達物質を用いている、あるいはsLNvから介在ニューロンを介してPTTH細胞へ連絡している可能性もある。オオクロコガネ 時計遺伝子periodのin situ hybridization により、視葉メダラ基部に細胞塊が染色された。これは、これまでに他種でPERIOD免疫陽性細胞が見られる解剖学的位置と一致した。
（日数経過に伴う変化の探索）ナミニクバエ sLNvが前大脳背側に投射する軸索末端の複雑性が光周期によって変化するかをバリコシティの数で比較する実験を行った。産仔後5日間、短日または長日を経験させた後、幼虫を4時間毎にサンプリングし、sLNvをPDF免疫組織化学により染色した。現在、データ解析中である。オオクロコガネ 脳のRNA-seqにより、時計遺伝子の発現を調べたところ、明暗、恒暗条件ともに約24時間周期で振動する遺伝子と、約48時間周期で振動する遺伝子が存在した。これより、時計遺伝子の一部が二日周期の発振に関与する可能性がある。
（時計遺伝子機能抑制の計数機構に対する影響の解析）オオクロコガネ 時計遺伝子二種類のRNA干渉実験を行った。まだ例数は少ないが、いずれの遺伝子においても、地上への出現行動に見られる自由継続周期が対照実験に比べ短くなった。
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