2019 Fiscal Year Research-status Report
部分的上皮間葉細胞転換（ハイブリッドEMT）の安定化因子を標的とする肺癌治療
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19K22617
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| Research Institution | Nagoya University |
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Principal Investigator |
佐藤 光夫 名古屋大学, 医学系研究科(保健), 教授 (70467281)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
長谷 哲成 名古屋大学, 医学部附属病院, 助教 (30621635)
湯川 博 名古屋大学, 未来社会創造機構, 特任准教授 (30634646)
田中 一大 名古屋大学, 医学部附属病院, 病院助教 (40809810)
川井 久美 名古屋大学, 医学系研究科(保健), 准教授 (50362231) [Withdrawn]
川口 晃司 名古屋大学, 医学部附属病院, 病院准教授 (10402611) [Withdrawn]
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| Project Period (FY) |
2019-06-28 – 2021-03-31
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| Keywords | 上皮間葉細胞転換 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
上皮間葉細胞転換（epithelial to mesenchymal transition, EMT）は癌細胞が上皮系から間葉系へ転換し悪性度を増強する現象である。これまでは、完全にEMTを完了した細胞の悪性度が最も高いと信じられてきた。しかし、最近の報告と応募者の準備データは予想に反し、部分的なEMT細胞、すなわちハイブリッドEMTの方が完全なEMT細胞に比べ癌幹細胞性質などの悪性形質が高いと示唆する。また、ハイブリッドEMTを安定化する未知の因子の存在が推測され、これは癌の悪性形質を決定している有望な治療標的の可能性がある。本研究は肺癌治療標的として期待されるハイブリッドEMTの“安定化因子”の発見を目的とする。2019年度はEMT安定化因子候補である遺伝子A(論文未発表にてAとする)の肺癌細胞における機能を評価した。複数の肺癌細胞株を使用し、RNA干渉によって遺伝子Aノックダウンを実施した。遺伝子ノックダウンの効率をウエスタンブロットで評価した。癌細胞の増殖を足場依存性および足場非依存性条件の両者において評価した。足場非依存性増殖能は軟寒天中のコロニー形成にて評価した。我々はある肺癌細胞株において、遺伝子Aノックダウン足場依存性増殖にはほとんど影響がなく、足場非依存性増殖能を強く抑制する結果を得た。足場非依存性増殖は細胞が細胞外のマトリックス等への接着を失った状態での増殖である。正常細胞は足場非依存性の状態では通常、細胞死に至る。対照的に癌細胞は足場非依存性増殖能を獲得していることが多く、その能力は浸潤能や転移能と深く関係しており、癌細胞の重要な悪性形質の一つである。したがって、我々の結果は遺伝子Aが肺癌の有望な治療標的となりうることを示唆した。今後は、足場非依存性増殖能を別のアッセイ系で評価し結果の確認を実施する。確認された場合は、遺伝子Aノックダウンによる足場非依存性増殖の抑制機序を明らかとする。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
2019年度はEMT安定化因子候補である遺伝子A(論文未発表にてAとする)の肺癌細胞における機能を評価した。複数の肺癌細胞株を使用し、RNA干渉によって遺伝子Aノックダウンを実施した。遺伝子ノックダウンの効率をウエスタンブロットで評価した。癌細胞の増殖を足場依存性および足場非依存性条件の両者において評価した。足場非依存性増殖能は軟寒天中のコロニー形成にて評価した。我々はある肺癌細胞株において、遺伝子Aノックダウン足場依存性増殖にはほとんど影響がなく、足場非依存性増殖能を強く抑制する結果を得た。今後は、足場非依存性増殖能を別のアッセイ系で評価し結果の確認を実施する。確認された場合は、遺伝子Aノックダウンによる足場非依存性増殖の抑制機序を明らかとする。また、遺伝子Aを含む候補遺伝子ならびにEMT関連遺伝子のタンパク発現をウエスタンブロットによって肺癌細胞パネルを使用して実施予定である。そのために、肺癌細胞パネルからのタンパク、RNA、DNAの抽出をほぼ完了した。2020年度も継続して実施する。
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| Strategy for Future Research Activity |
肺癌の治療標的としての可能性を持つ遺伝子Aの機能評価を軸に研究を推進する。具体的には、複数のEMT状態の異なる肺癌細胞における遺伝子Aのがん促進作用を評価する。これによって、遺伝子Aの機能がEMT状態依存性であるかどうかを明らかとする。また、遺伝子Aノックダウンによる足場非依存性増殖能の抑制作用の機序を明らかとしていく。さらに、in vivo実験を追加し、遺伝子A標的治療の臨床応用への可能性も評価する。
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| Causes of Carryover |
当初の計画より進捗が遅れたため、次年度使用額が生じた。本年度は昨年度未使用金を併せて使用することにより計画の遅れを取り戻すことを目指す。
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Research Products
(1 results)
