2019 Fiscal Year Research-status Report
幹細胞をキャリアとして利用した骨肉腫肺転移に対するウイルス療法の開発
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19K22697
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| Research Institution | Hyogo Medical University |
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Principal Investigator |
久保 秀司 兵庫医科大学, 医学部, 准教授 (10441320)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
山野 智基 兵庫医科大学, 医学部, 准教授 (00599318)
麸谷 博之 兵庫医科大学, 医学部, 教授 (30248140)
中込 隆之 兵庫医科大学, 医学部, 教授 (80434950)
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| Project Period (FY) |
2019-06-28 – 2022-03-31
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| Keywords | がんウイルス療法 / 増殖型レトロウイルスベクター / 骨肉腫 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
申請者らが開発した増殖型レトロウイルスベクター(RRV)を用いたがんウイルス療法の骨肉腫肺転移への適応拡大を目指し、間葉系幹細胞（MSC: Mesenchymal Stem Cell）をキャリアとして利用した腫瘍へのRRV輸送法の開発を目指す。
１. MSC及び骨肉腫細胞におけるRRVの感染効率、増殖効率、RRV産生能の評価
ヒトMSC（骨髄由来３株、脂肪由来１株、臍帯由来１株）及びヒト骨肉腫細胞株６株について、GFP発現RRVを用いて、RRVの感染効率、増殖効率及びRRV産生能を評価した。いずれのMSCにおいても骨肉腫腫瘍細胞株に比べ、感染効率は2～15倍低く、増殖効率は10～25倍低かった。しかしウイルス量を増やす事で10cmディッシュ程度のスケールでも一度の感染で100%の効率を得られた。RRV産生能については、いずれのMSCにおいても腫瘍細胞株に比べ10倍以上低かった。
２. MSCの腫瘍細胞への遊走、RRV伝達効率の評価
レンチウイルスベクターを用いてGFP標識したMSCとmCherry標識した腫細胞株をTranswell plateを用いた培養系を用い、MSCの骨肉腫細胞株への遊走能を検討した。いずれのMSCも足場依存性及び非依存性の腫瘍遊走能を示した。さらにGFP発現RRVを感染させたMSCとmCherry標識ヒト骨肉腫細胞株をTranswell plateを用いた培養系を用い、MSCから腫瘍細胞へのRRV伝達効率の評価を検討した。いずれのMSCも腫瘍細胞にRRVを伝達することが明らかとなった。さらに接触共培養においては、Transwell plateを用いた培養（非接触共培養）に比べ、RRV伝達効率が格段に向上することが判明した。
以上の結果より、MSCをキャリアとしてRRVを癌に効率良く到達・分配させる技術のin vitroにおける原理証明ができた。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
これまでのin vitroにおける実験については、おおむね計画通りに進んでいる。
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| Strategy for Future Research Activity |
今後は、申請計画通りにマウスを用いた実験を進める。
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| Causes of Carryover |
理由：培養用の培地、試薬を購入する予定であったが、在庫が残っていたため、購入を次年度に持ち越した。
使用計画：培養用の培地、試薬を購入する。
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