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2019 Fiscal Year Research-status Report

生体組織間シグナルカスケード理解のための、多視点・多臓器同時イメージング法の開発

Research Project

Project/Area Number 19K22959
Research InstitutionHamamatsu University School of Medicine

Principal Investigator

本藏 直樹  浜松医科大学, 医学部, 助教 (40518081)

Project Period (FY) 2019-06-28 – 2021-03-31
Keywords非侵襲生体光イメージング / 多視点同時記録 / 血管生理学
Outline of Annual Research Achievements

多臓器が関与する生命現象をあきらかにするために、同一個体の様々組織を一切の時間遅れなく連続に生理機能を捕捉する方法論が求められている。特に分子・細胞レベルの空間解像を有した超高速顕微鏡画像取得は、生体で起こる早い生命反応を細かな時空間スケールで、また多次元情報を内包した画像として記録できるため、これまでも生命現象を記録する分野において活躍してきた。しかしながら現状、最新の非線形光学顕微鏡を用いて生体光イメージングをおこなっても、その観察領域はとても限られた視野内(最大1mm^2 程度)での反応を記録するのみである。すなわち多臓器がほぼ同時に機能発動するような現象において、個々の組織活動を同時記録することは、ほとんど不可能である。すなわち生体シグナルが連続的に様々な器官に送受信される現象を正確に記録するためには、独立多視点・多臓器高速イメージング法が必須である。しかし残念ながらこれらの技術は確立されていない。 そこでこれに対応するために、申請者は高開口液浸対物レンズおよび光検出器を内包した3次元可動軸を持つ複数のアームを接続した非線形光学顕微鏡の作成、およびそれを用いた時間遅れのない多臓器高速イメージング法の開発を試みた。
現状までにこれらを実現するための顕微鏡のセットアップを終え、まずは独立2視野を偏光連続切り替えにより実現しつつある。また2組の対物レンズの設置範囲は数ミリ以上の距離であっても問題なく作動していることを確認できた。来年度に向けこれらの装置と生体光イメージングとを組み合わせることで、生体組織間シグナルを計測することを試みる。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

生体光イメージング技術を基盤とした多視点同時記録は、生体の真のシグナル伝達を理解する上で最も重要なシステムとなり得る。しかしながら独立した視野を同時記録するためには、複雑なアーム機構を持ったシステムを組む必要があるため、小型動物でそのような装置を組むことは非常に難しい問題であった。
そこで本研究において、これらの問題を解決するために光の偏光方向を巧みに利用することで解決を図った。現状これらの偏光を瞬時に変えるための液晶素子などの導入によっておこなうことを想定しているが、現状は電動にて変更する速度にておこなっている。今後より高速化をおこなうために液晶素子の導入を早急におこないたいと考えている。

Strategy for Future Research Activity

顕微鏡の開発にめどが立ったため、今後はこれらの顕微鏡をもちいて、生体光イメージングと組み合わせることで、真の臓器間および組織間生体シグナルを記録することを試みる。これが成功することで様々な生体の現象・応答・反応を細かな時空間スケールで解析することが可能となり、今まで未知であった生体間シグナル連動などの複雑な機構も捕らえられるのではないかと強く推定している。

Causes of Carryover

コロナウィルスによる影響により納品が遅れたものがあったため。

  • Research Products

    (10 results)

All 2020 2019

All Journal Article (2 results) (of which Int'l Joint Research: 1 results,  Peer Reviewed: 1 results,  Open Access: 1 results) Presentation (8 results) (of which Int'l Joint Research: 3 results,  Invited: 4 results)

  • [Journal Article] Recognition of Plasminogen Activator Inhibitor Type 1 as the Primary Regulator of Fibrinolysis2019

    • Author(s)
      Urano Tetsumei、Suzuki Yuko、Iwaki Takayuki、Sano Hideto、Honkura Naoki、Castellino Francis J.
    • Journal Title

      Current Drug Targets

      Volume: 20 Pages: 1695~1701

    • DOI

      10.2174/1389450120666190715102510

    • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] Noninvasive intravital imaging techniques: In order to capture genuine physiological responses2019

    • Author(s)
      HONKURA Naoki
    • Journal Title

      Japanese Journal of Thrombosis and Hemostasis

      Volume: 30 Pages: 529~533

    • DOI

      https://doi.org/10.2491/jjsth.30.529

  • [Presentation] 非侵襲・非線形光学顕微鏡を用いた微小循環における物質放出の解明2020

    • Author(s)
      本藏 直樹
    • Organizer
      第97回日本生理学会大会(誌上開催)
    • Invited
  • [Presentation] Intravital imaging analysis for the substance discharge in microcirculation using noninvasive and nonlinear optical microscopy2020

    • Author(s)
      Naoki Honkura
    • Organizer
      Gordon Research Conference(GRC): Plasminogen Activation and Extracellular Proteolysis
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Application of nonlinear optical effects in intravital imaging to reveal functional blood circuit.2019

    • Author(s)
      Naoki Honkura
    • Organizer
      第27回日本血管生物医学会学術集会
    • Invited
  • [Presentation] 非線形光学顕微鏡を用いた生体物質交換の解析2019

    • Author(s)
      本藏 直樹
    • Organizer
      第170回 n-bio セミナー
    • Invited
  • [Presentation] Intravital imaging with nonlinear optical effects has shown up functional blood circuit2019

    • Author(s)
      Naoki Honkura
    • Organizer
      第21回高柳健次郎記念シンポジウム
    • Int'l Joint Research / Invited
  • [Presentation] 非線形光学顕微鏡を用いた生体血管分別法およびその構造機能解析2019

    • Author(s)
      本藏 直樹
    • Organizer
      第66回中部生理学会
  • [Presentation] 最尖端生体光学イメージング技術を用いた新規血管分類法と動的な血管機能の評価2019

    • Author(s)
      本藏 直樹
    • Organizer
      第41回日本血栓止血学会学術集会
  • [Presentation] Advanced intravital imaging techniques for vessel discrimination and assessment of physiological vascular dynamics in in vivo2019

    • Author(s)
      Naoki Honkura
    • Organizer
      The 19th Hamamatsu-Kyungpook Joint Medical Symposium
    • Int'l Joint Research

URL: 

Published: 2021-01-27  

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