2020 Fiscal Year Annual Research Report
RNAレプリコンによる遺伝子治療を実現する高分子ミセル型ナノキャリアの開発
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19K23614
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| Research Institution | Kanagawa Institute of Industrial Sclence and Technology |
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Principal Investigator |
宮崎 拓也 地方独立行政法人神奈川県立産業技術総合研究所, 「貼るだけ人工膵臓」プロジェクト, 研究員(任期有) (80844779)
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| Project Period (FY) |
2019-08-30 – 2021-03-31
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| Keywords | RNAレプリコン / ポリエーテル / ブロック共重合体 / 高分子ミセル / ドラッグデリバリーシステム / 遺伝子治療 / メッセンジャーRNA / トランスフェクション |
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| Outline of Annual Research Achievements |
RNAレプリコンは、自己複製により持続的に治療用タンパク質を産生することから、核酸医薬としての応用が期待されている。その一方で、酵素分解などが課題として残されている。そこで本研究は、柔軟性ポリエーテルを用いたRNAレプリコン内包高分子ミセルの創製を目的とした。具体的には、ポリマーの側鎖構造にRNAと強く相互作用する機能性アミノ酸を導入し、ミセル構造の安定化による酵素耐性の向上を図った。本年度は以下の3つの項目：1）mRNA内包ミセルの調製および機能性アミノ酸のスクリーニング、2）選定した高機能ポリマーによるRNAレプリコン内包ミセルの調製、3）ミセルのin vitro機能評価を行った。1）に関して、ロイシン・トリプトファン・チロシン・グリシンを導入したポリマーを用いてmRNA内包ミセルを構築した。その結果、粒径約60nmのナノ粒子を調製できること、ポリアニオンに対する安定性を向上できること、RNA分解酵素に対する安定性を向上できること、および培養細胞にmRNAを導入できることを明らかにした。2）に関して、トリプトファンを導入したポリマーを用いてRNAレプリコン内包ミセルを作製し、その粒径および粒径分布を制御する手法を確立した。3）に関して、ミセル化により培養細胞への導入効率が向上し、従来のmRNA内包ミセルよりも優れた持続性を示すことを確認した。よって、RNAレプリコン内包ミセルの基盤を確立するとともに、生体内で治療用タンパク質を産生できる可能性を見出した。
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