2019 Fiscal Year Research-status Report
体表粘液に着目したプロテオーム解析によるサクラマス種苗の感染症早期診断技術の開発
Project/Area Number |
19K23690
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Research Institution | Hokkaido Research Organization |
Principal Investigator |
西川 翔太郎 地方独立行政法人北海道立総合研究機構, 水産研究本部 さけます・内水面水産試験場, 研究職員 (80845727)
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Project Period (FY) |
2019-08-30 – 2021-03-31
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Keywords | 魚病 / サクラマス / プロテオーム / 体表粘液 |
Outline of Annual Research Achievements |
本研究では、稚魚期のサクラマスの体表粘液におけるタンパク質発現動態を網羅的に解析し、顕著に変動したタンパク質を感染症罹病の指標として検出する感染症早期診断技術の開発を目的とする。 令和元年度は感染症罹病の指標となるタンパク質を探索するため、サクラマスの体表粘液中に存在するタンパク質の発現状況ならびに病原体感染により変動するタンパク質の解明を目指した。所属機関で孵化・飼育したサクラマス稚魚を供試魚として用いて、伝染性造血器壊死症ウイルス培養液および冷水病原因菌培養液にそれぞれ浸漬させる感染実験を実施した。伝染性造血器壊死症ウイルスはノビラブドウイルス属に含まれるウイルスで、多くのサケ科魚に感染し大量死を引き起こすことで知られている。また冷水病原因菌はグラム陰性細菌であり、これにより引き起こされる冷水病はアユやサケ科魚類全般で発生する。病原体に浸漬する前(健常時)、感染させた1日後および7日後に体表粘液を採取し、液体クロマトグラフ質量分析計を用いて体表粘液中に含まれるタンパク質を網羅的に検出した。その結果、細胞増殖過程に関連するタンパク質、代謝に関連するタンパク質、生体内調節に関連するタンパク質の発現が多数確認された。また、伝染性造血器壊死症ウイルスおよび冷水病原因菌感染魚の体表粘液中でのみ発現が認められたタンパク質はともに60種であった。伝染性造血器壊死症ウイルス感染魚の体表粘液では抗ウイルスタンパク質の一種であるIFN induced GTP-binding protein Mx2を含む9種のタンパク質が、冷水病原因菌感染魚の体表粘液では脂質代謝に関与する酵素の活性化することで知られるApolipoprotein A-I-1を含む7種のタンパク質が有意に変動することが示された。
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Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
令和元年度は研究計画に沿ってサクラマス稚魚に対し2種類の病原体を用いた感染試験を実施し、体表粘液におけるタンパク質の発現動態を明らかにしており、本研究が順調に進展していると判断する。
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Strategy for Future Research Activity |
令和元年度の研究成果をもとに感染症バイオマーカー候補を選出し、感染症早期診断技術を確立する。
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