2021 Fiscal Year Annual Research Report
Understanding molecular mechanisms that regulate neuronal diversity using DamID technique
Project/Area Number |
19K23739
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Research Institution | Ibaraki University |
Principal Investigator |
鈴木 匠 茨城大学, 理工学研究科(理学野), 助教 (30623764)
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Project Period (FY) |
2019-08-30 – 2022-03-31
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Keywords | DamID / ショウジョウバエ |
Outline of Annual Research Achievements |
本年度は、前年度に作出したTF-Dam融合タンパク質を発現する遺伝子組換え系統をを用いてSlpの標的遺伝子の特定を試みた。視覚中枢に存在する幹細胞プールをそれぞれ特異的に操作できる系統 GMR35AH02を用いてTFsの1つであるSlpのDam融合タンパク質を発現させ、Slpの下流遺伝子を探索した。同時に、RNA ポリメラーゼII-Damを用いて、それぞれの幹細胞プールにおけるトランスクリプトーム解析を行い、Slpの下流遺伝子候補が実際に発現しているかどうかを確認した。
DamID解析の結果、数百におよぶ候補遺伝子が同定されたが、このうち転写因子に注目するとdanと呼ばれる遺伝子の調節領域にSlpの最も強い結合が確認された。また、本研究で行ったトランスクリプトーム解析の結果から、danは神経幹細胞で発現していることがわかった。以上のことから、danはSlpの下流で機能する遺伝子である可能性が考えられる。今後、danの変異体系統などを用いて機能解析を行うことによって、danが実際にSlpの下流で機能していることを確認する予定である。
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