2019 Fiscal Year Research-status Report
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19K23755
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| Research Institution | Yamaguchi University |
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Principal Investigator |
徳永 雅之 山口大学, 大学院医学系研究科, 助教 (10845043)
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| Project Period (FY) |
2019-08-30 – 2021-03-31
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| Keywords | Arhgap11A / 硬さ / YAP |
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| Outline of Annual Research Achievements |
緻密に制御された脳組織が立体的に形作られるためには、神経前駆細胞が未分化のまま増殖することと発生の決まった時期に神経細胞を生み出すことが重要である。しかし、どのように神経前駆細胞の増殖と分化が適切に制御され、脳組織が形作られているのか詳細は不明である。研究代表者はこれまでの成果から、YAP-ARHGAP11Aネガティブフィードバックループが神経前駆細胞の増殖と分化のバランス制御に重要であることを見出している。しかし、このループがどう制御されているかは不明である。
本研究では、組織内部の硬さと力を測定の可能にした方法(Serwane Nat Methods. 2017)を脳組織に応用して、神経前駆細胞の増殖・分化の制御メカニズムの解明から脳組織がどう立体構築されているかの理解および、うつや不安障害など精神疾患治療への発展を目指す。本年度は、マウス脳組織における硬さ測定法の樹立を試みた。その結果成体マウス脳へ磁性流体を注入し脳組織の硬さを予備的に測定することに成功した。次年度はこの成果をマウス胎児脳への応用を試みる予定である。また、Arhgap11Aの市販抗体の免疫染色における特異性に疑問が生じたため、抗体を受託作製した。その抗体を用いて、マウスES細胞でARHGAP11Aたんぱく質の局在がパッチ状であることを、明らかにした。Arhgap11Aは細胞周期に依存してその発現が変化することが知られており、次年度は細胞周期にも着目し、さらに解析を進める予定である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
抗Arhgap11A抗体の特異性に疑問が生じ、急遽Arhgap11A抗体を自作したため、その他の計画に遅れが生じている。
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| Strategy for Future Research Activity |
今後は、自作したArhgap11A抗体の特異性を確認。マウス胎児脳組織での硬さ測定と、硬さ測定を行った周囲の細胞におけるArhgap11AとYAPの局在を明らかにしていく。また、マウスESコロニーでのArhgap11Aたんぱく質の発現がパッチ状である原因を細胞周期の点からアプローチしていく。
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| Causes of Carryover |
抗体の特異性に疑問が生じたため研究計画を一時中断し、抗体を作成した。そのため当初予定していた物品費を次年度の実験試薬購入費に充てる。本年に参加を予定していた分子生物学会に多忙のため参加することがかなわなかったため、この未使用額も次年度の学会への旅費、参加費に合算して使用する予定である。マウス飼育費に充てているその他に関しても次年度の飼育費と合算して使用する予定である。
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