2020 Fiscal Year Annual Research Report
Kaiso, P120複合体を標的としたリンパ系腫瘍に対する新規治療法の開発
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19K23921
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| Research Institution | Sapporo Medical University |
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Principal Investigator |
堀口 拓人 札幌医科大学, 医学部, 研究員 (70634674)
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| Project Period (FY) |
2019-08-30 – 2021-03-31
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| Keywords | リンパ性白血病 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
急性Ｂ細胞性リンパ性白血病細胞株（ＢＡＬＬ－１、ＨＡＬ－０１、ＮＡＬＭ－６）、T細胞性リンパ性白血病細胞株（ＴＡＬＬ、ＭＯＬＴ－４、Ｊｕｒｋａｔ）を購入。細胞培養し、ＴｒｉｚｏｌでＲＮＡを採取した。ＲＴ－ｑＰＣＲでは、ＫＡＩＳＯ ｍＲＮＡはＢ細胞性リンパ性白血病細胞株のＢＡＬＬ－１, ＨＡＬ－０１で有意に正常Ｂ細胞と比較して低下しており, Ｔ細胞性リンパ性白血病細胞株のＪｕｒｋａｔ, ＭＯＬＴ－４, ＴＡＬＬで有意に正常T細胞より低下していた。また、δカテニン(Ｐ１２０) ｍＲＮＡはすべての細胞株でそれぞれ正常Ｂ細胞、正常Ｔ細胞と比較し優位に低下していることが明らかとなった。
一方で、蛋白発現の解析として、Western blot法を行ったが、Western blot用のwhole lysate、細胞質と核内に分画化したlysateをそれぞれ、RIPA bufferとFractionation kitを用いて採取した。
Western blotではwhole lysateではＫＡＩＳＯを検出されるが、ごくわずかしか検出できなかった。これは蛋白量が不十分であった可能性があり、十分な細胞量でソニケーターを用いて十分な蛋白量を泳動する必要性が考えられた。
分画化したlysateでは、さらに蛋白濃度が低くごく少量しか採取できなかったため、別の方法を模索する必要がある。
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