2020 Fiscal Year Annual Research Report
歯周炎による血液脳関門障害遺伝子の解析およびアルツハイマー病への影響
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19K24078
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| Research Institution | Health Sciences University of Hokkaido |
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Principal Investigator |
森川 哲郎 北海道医療大学, 歯学部, 助教 (90845463)
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2019-08-30 – 2021-03-31
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| Keywords | 血液脳関門 / LPS / 歯周病 / p. gingivalis |
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| Outline of Annual Research Achievements |
脳には血液脳関門（Blood Brain Barrier: BBB）があり、血液中から脳組織への物質の移行は厳密に制限されている。近年、正常なヒトの脳組織には見られない歯周病原菌であるPorphyromonas gingivalis（P. gingivalis）がアルツハイマー病患者の剖検脳組織において検出されたとの報告がある。また、マウスを用いた研究においても、脳内からP. gingivalisやP. gingivalis由来の内毒素が検出され、脳内のアミロイドβタンパクが増加していることから、歯周病原因菌のアルツハイマー病への関与が示唆されている。しかし、P. gingivalisがどのような機序でBBBを通過しているのかについては未だ明らかとされていない。
そこで本研究では、P. gingivalis由来のLPSを用いて、BBBを障害した後に脳海馬へ到達し、アルツハイマー病の発症・進行に影響するかについてそのメカニズムを明らかにすることを目的とする。そこで、BBB構成細胞の1つであり、物質の輸送において重要な役割を担っているとされるヒト脳血管内皮細胞を用いた。P. gingivalis由来LPSをヒト脳血管内皮細胞に添加し24時間の短期培養を行った。その後、培養細胞からRNAを抽出し、細胞間隙輸送を制限しているタイトジャンクションの構造と機能を担う接着分子の1つであるクローディン５の発現について定量的PCRを用いて確認した。その結果、P. gingivalis由来LPSの刺激がクローディン５の発現を低下させる可能性が示唆された。その後、P. gingivalis由来LPSを24時間添加した細胞からDNA及びタンパク質の抽出を行い。DNAメチル化解析とウエスタンブロットを行なったが、これらの研究からは有意な差はみられなかった。
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