2020 Fiscal Year Research-status Report
Elucidation of mechanical stress response mechanism using imaging analysis of genetically modified zebrafish
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19KK0233
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| Research Institution | Showa University |
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Principal Investigator |
茶谷 昌宏 昭和大学, 歯学部, 講師 (80628628)
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2019-10-07 – 2024-03-31
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| Keywords | ゼブラフィッシュ / メダカ / 骨 / 血管 / 心臓 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
生体内ではメカニカルストレスが絶えず生じており、正常な器官の活動には欠かせない存在である。骨、心臓、血管はメカニカルストレスの影響を直接的に受ける器官の代表例であり、これらの器官形成メカニズムを調べることは、メカニカルストレス受容機構の解明につながる。
近年、血管細胞と造血細胞の両方を調節する未知遺伝子として転写因子のnpas4lがゼブラフィッシュの研究により同定された。このnpas4l欠損ゼブラフィッシュ胚と野生型ゼブラフィッシュ胚を用いて同発生期における網羅的遺伝子発現解析を行ったところ、ある特定の遺伝子ファミリーの遺伝子発現レベルが顕著に向上する新しい細胞集団を見出した。
npas4l遺伝子の機能をさらに詳細に調べるため、同じ小型魚類に属するメダカのnpas4l遺伝子を同定し、npas4l欠損メダカを作製した。このメダカ変異体の表現型はゼブラフィッシュの表現型に基本的な部分で類似している部分が多く、現在、骨関連遺伝子改変メダカ系統と掛け合わせてnpas4lの機能を解析する準備を続けている。
さらに、ゼブラフィッシュとメダカのそれぞれの心臓における損傷の再生能の違いについて遺伝子発現レベルの解析を行っている。その結果、ある特定の遺伝子ファミリーの遺伝子発現レベルで違いが見られており、現在詳細な解析を検討している。
ゼブラフィッシュとメダカの生物間の遺伝子発現レベルや細胞挙動の相違を調べ、造血・血管・骨の形成メカニズムの解明を目指す。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
新型コロナウイルスの影響で海外への渡航が遅れている。今年に渡航予定であり、これまでに行ってきた解析をさらに進める予定である。npas4l ゼブラフィッシュ変異体で遺伝子発現レベルが高い新たな細胞集団を見出した。npas4lメダカ変異体を新たに作製、維持しており、骨関連遺伝子改変メダカを利用して解析する。ゼブラフィッシュとメダカの相違を調べ、npas4lの新機能解明を目指している。心臓再生現象についても解析を進める。
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| Strategy for Future Research Activity |
npas4lメダカ変異体と野生型メダカとの網羅的遺伝子発現解析を行い、ゼブラフィッシュと比較する。遺伝子改変メダカを用いて細胞を蛍光標識し、細胞の動態を詳しく解析することで、npas4l変異体の表現型を調べる。npas4lゼブラフィッシュ変異体とnpas4lメダカ変異体を詳細に比較し、２生物間の表現型の相違から、npas4lの機能を明らかにする。心臓再生現象についても解析を進める。造血と血管形成、さらには骨の形成メカニズムの解明を目指す。
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| Causes of Carryover |
2019年後半から拡大が広まった新型コロナウイルスによる世界的な感染被害により、留学の延期が余儀なくされ、これが原因となり、留学に必要な資金を繰り越すこととなった。
今後は、本研究計画が予定通り遂行できるように、随時の使用を計画している。
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[Journal Article] Myelination during fracture healing in vivo in myelin protein zero (p0) transgenic medaka line.2020
Author(s)
Dodo Y, Chatani M, Azetsu Y, Hosonuma M, Karakawa A, Sakai N, Negishi-Koga T, Tsuji M, Inagaki K, Kiuchi Y, Takami M.
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Journal Title
Bone
Volume: 133
Pages: 115225
DOI
Peer Reviewed
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