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2008 Fiscal Year Annual Research Report

脳機能解析に最適化した遺伝子改変マウス作成システムの構築

Research Project

Project/Area Number 20019019
Research InstitutionNiigata University

Principal Investigator

崎村 建司  Niigata University, 脳研究所, 教授 (40162325)

Keywords神経科学 / バイオテクノロジー / 遺伝子 / 発生工学
Research Abstract

本研究の目的は、脳の特定な部位や細胞に限定した標的遺伝子の欠損が出来るCreリコンビネース発現マウスを系統的に作出し、脳機能を分子レベルで解明するリソースを開発することである。このために、我々は本年度新たな方法を開発した。第1に迅速遺伝子改変ベクター作成法である。構築の迅速化を図るために、ES細胞での相同組換えに必要な薬剤耐性カセットやネガティブ選択に用いるジフテリア毒素遺伝子カセットなどをあらかじめ組み込んだ汎用ベクターを用いて、BACクローンでのRED/ET組み換え法、さらにラムダファージの組み換え系を利用して多種類のDNA断片を一時に結合して相同組み換えベクターを作成する。この方法の特徴は、これまでベクター作成時に問題になっていたDNAライゲーションのステップを用いないので、特別な訓練を受けていない学生や技官にもできるところにある。第2に、ES細胞での相同組換え効率を高めるために薬剤耐性カセットを改良した。UPA-trap型ターゲティングベクターを用いることで、薬剤耐性コロニーの中にしめる相同組み換え体の割合を上げることができた。これらの技術改良は、遺伝子改変マウスを迅速かつ安価に作成する上できわめて重要なものである。
また本研究では、各種細胞選択的にCreリコンビナーゼ発現するマウスを作製した。海馬CA3錐体細胞で特異性高く組換えが惹起できるGRg1Creの他、海馬CA1錐体細胞選択的なCP14、小脳プルキンエ細胞のD2CRE、小脳顆粒細胞に選択性の高いGRe3iCre、ほぼ全ての顆粒細胞にCreを発現するTiamlCreである。これらCre発現マウスは特定研究「統合脳」の班員のみならず広く脳研究をおこなう研究者に提供する予定である。

  • Research Products

    (30 results)

All 2009 2008 Other

All Journal Article (9 results) (of which Peer Reviewed: 9 results) Presentation (20 results) Remarks (1 results)

  • [Journal Article] Influence of parallel fiber-purkinje cell synapse formation on postnatal development of climbing fiber-purkinje cell synapses in the cerebellum2009

    • Author(s)
      Hashimoto K, et.al
    • Journal Title

      Neuroscience (印刷中)

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Ablation of NMDA receptors enhances the excitability of hippocampal CA3 neurons2009

    • Author(s)
      Fukushima F, et.al
    • Journal Title

      PLoS ONE 4(1)

      Pages: e3993

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] A novel form of memory for auditory fear conditioning at a low-intensit y unconditioned stimulus.2009

    • Author(s)
      Kishioka A, et.al
    • Journal Title

      PLoS ONE 4(1)

      Pages: e4157

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Spontaneous hyperactivity in mutant mice lacking the NMDA receptor GluRepsilon1 subunit is aggravated during exposure to 0.1 MAC sevoflurane and is preserved after emergence from sevoflurane anaesthesia2008

    • Author(s)
      Petrenko AB, et.al
    • Journal Title

      Eur J Anaesthesiol 25(12)

      Pages: 953-60

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] ノックアウトマウス作製の現状と方向性2008

    • Author(s)
      崎村建司, 他
    • Journal Title

      蛋白質核酸酵素 53(11)

      Pages: 1383-91

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Cysteinyl leukotriene 2 receptor-mediated vascular permeability via transendothelial vesicle transport2008

    • Author(s)
      Moos MP, et.al
    • Journal Title

      FASEB J 22(12)

      Pages: 4352-62

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Expression and possible role of creatine transporter in the brain and at the blood-cerebrospinal fluid barrier as a transporting protein of guanidinoacetate, an endogenous convulsant2008

    • Author(s)
      Tachikawa M, et.al
    • Journal Title

      J Neurochem 107(3)

      Pages: 768-78

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Serine Racemase is predominantly localized in neurons in mouse brain.2008

    • Author(s)
      Miya K., et.al
    • Journal Title

      J Comp Neurol 510(6)

      Pages: 641-54

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Enhancement of Both Long-Term Depression Induction and Optokinetic Response Adaptation in Mice Lacking Delphilin2008

    • Author(s)
      Takeuchi, T., et.al
    • Journal Title

      PLoS ONE 28 ; 3(5)

      Pages: e2297

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] 連鎖解析によるウシ採卵性制御遺伝子の同定2008

    • Author(s)
      杉本真由美
    • Organizer
      BMB2008(第31回日本分子生物学会年会・第81回日本生化学会大会)
    • Place of Presentation
      兵庫県神戸市(神戸ポートアイランド)
    • Year and Date
      2008-12-11
  • [Presentation] リゾホスファチジン酸第4受容体(LPA4)のマウス発生器における役割2008

    • Author(s)
      柳田圭介
    • Organizer
      BMB2008(第31回日本分子生物学会年会・第81回日本生化学会大会)
    • Place of Presentation
      兵庫県神戸市(神戸ポートアイランド)
    • Year and Date
      2008-12-11
  • [Presentation] 神経細胞の多様化におけるプロトカドヘリンαのクラスター型ゲノム構造の関与2008

    • Author(s)
      金子涼輔
    • Organizer
      BMB2008(第31回日本分子生物学会年会・第81回日本生化学会大会)
    • Place of Presentation
      兵庫県神戸市(神戸ポートアイランド)
    • Year and Date
      2008-12-11
  • [Presentation] 神経変性疾患モデル作製のための26Sプロテアソームコンディショナルノックアウトマウスの確立と解析2008

    • Author(s)
      田代善崇
    • Organizer
      BMB2008(第31回日本分子生物学会年会・第81回日本生化学会大会)
    • Place of Presentation
      兵庫県神戸市(神戸ポートアイランド)
    • Year and Date
      2008-12-11
  • [Presentation] C57BL/6N純系のApp(amyloid beta-precursor protein)ノックアウトマウスの解析2008

    • Author(s)
      薄井宏
    • Organizer
      BMB2008(第31回日本分子生物学会年会・第81回日本生化学会大会)
    • Place of Presentation
      兵庫県神戸市(神戸ポートアイランド)
    • Year and Date
      2008-12-10
  • [Presentation] 非EDG型リゾホスファチジン酸受容体の生体機能2008

    • Author(s)
      石井聡
    • Organizer
      BMB2008(第31回日本分子生物学会年会・第81回日本生化学会大会)
    • Place of Presentation
      兵庫県神戸市(神戸ポートアイランド)
    • Year and Date
      2008-12-09
  • [Presentation] Transmembrane AMPA receptor regulatory protein γ-8 is involved with the regulation of spontaneous activity and mental condition2008

    • Author(s)
      Yamazaki M
    • Organizer
      SfN (NEUROSCIENCE 2008)
    • Place of Presentation
      Washington, DC USA
    • Year and Date
      2008-11-17
  • [Presentation] Functionnal coupling between mGluR1 and Cav3.1 T-type calcium channels enhances cerebellar Purkinje cell excitability and local signaling2008

    • Author(s)
      Hildebrand ME
    • Organizer
      SfN (NEUROSCIENCE 2008)
    • Place of Presentation
      Washington, DC USA
    • Year and Date
      2008-11-15
  • [Presentation] マウスクロマフィン細胞における開口分泌の特性2008

    • Author(s)
      笹川展幸
    • Organizer
      第51回日本神経化学会大会
    • Place of Presentation
      富山県富山市
    • Year and Date
      2008-09-11
  • [Presentation] 脳機能解析に最適化した遺伝子改変マウス作成システムの構築2008

    • Author(s)
      崎村建司
    • Organizer
      統合脳・夏のワークショップ
    • Place of Presentation
      北海道札幌市
    • Year and Date
      2008-08-09
  • [Presentation] The transmembrane AMPA receptor regulatory protein gamma-7 regulates the stability and surface expression of AMPA receptors but may notmodulate their functions2008

    • Author(s)
      Yamazaki M.
    • Organizer
      6th FENS (Forum of European Neuroscience)
    • Place of Presentation
      Geneva, Switzerland
    • Year and Date
      2008-07-15
  • [Presentation] Gating of complex spike calcium transient by metabotropic glutamate receptors in cerebellar Purkinje cells2008

    • Author(s)
      Otsu Y
    • Organizer
      6th FENS (Forum of European Neuroscience)
    • Place of Presentation
      Geneva, Switzerland
    • Year and Date
      2008-07-15
  • [Presentation] Functionnal coupling between mGlurl and Cav3.1 t-type calcium channels enhances cerebellar Purkinje cell excitability and local signaling2008

    • Author(s)
      Isope P
    • Organizer
      6th FENS (Forum of European Neuroscience)
    • Place of Presentation
      Geneva, Switzerland
    • Year and Date
      2008-07-15
  • [Presentation] グルタミン酸受容体δ2のC末端細胞質内PDZドメイン結合領域のシナプス可塑性と登上線維回路形成における役割2008

    • Author(s)
      植村健
    • Organizer
      Neuroscience 2008(第31回日本神経科学大会)
    • Place of Presentation
      東京都(東京国際フォーラム)
    • Year and Date
      2008-07-11
  • [Presentation] グルタミン酸受容体δ2のPDZ結合領域の小脳での機能における役割2008

    • Author(s)
      安村美里
    • Organizer
      Neuroscience2008(第31回日本神経科学大会)
    • Place of Presentation
      東京都(東京国際フォーラム)
    • Year and Date
      2008-07-11
  • [Presentation] 線条体は弱い恐怖条件付け学習に関与する2008

    • Author(s)
      岸岡歩
    • Organizer
      Neuroscience 2008 (第31回日本神経科学大会)
    • Place of Presentation
      東京都(東京国際フォーラム)
    • Year and Date
      2008-07-10
  • [Presentation] FAK欠損マウスにおける小脳バーグマングリアの異所配置登上線維支配領域の低下2008

    • Author(s)
      渡辺文寛
    • Organizer
      Neuroscience2008(第31回日本神経科学大会)
    • Place of Presentation
      東京都(東京国際フォーラム)
    • Year and Date
      2008-07-10
  • [Presentation] TARPγ8は自発運動や不安などの精神活動に関連する分子である2008

    • Author(s)
      山崎真弥
    • Organizer
      Neuroscience 2008 (第31回日本神経科学大会)
    • Place of Presentation
      東京都(東京国際フォーラム)
    • Year and Date
      2008-07-10
  • [Presentation] マウス副腎髄質クロマフィン細胞における開口分泌の特性2008

    • Author(s)
      笹川展幸
    • Organizer
      Neuroscience 2008 (第31回日本神経科学大会)
    • Place of Presentation
      東京都(東京国際フォーラム)
    • Year and Date
      2008-07-09
  • [Presentation] 神経変性疾患モデル作製のための26Sプロテアソームコンディショナルノックアウトマウスの確立2008

    • Author(s)
      田代善崇
    • Organizer
      Neuroscience 2008 (第31回日本神経科学大会)
    • Place of Presentation
      東京都(東京国際フォーラム)
    • Year and Date
      2008-07-09
  • [Remarks]

    • URL

      http://www.bri.niigata-u.ac.jp/~cellular/

URL: 

Published: 2010-06-11   Modified: 2016-04-21  

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