2008 Fiscal Year Annual Research Report
膜蛋白質の機能変換から観る機能-構造変化の連関性と分子論的理解
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20050012
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| Research Institution | Nagoya University |
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Principal Investigator |
須藤 雄気 Nagoya University, 理学研究科, 助教 (10452202)
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| Keywords | 生物物理 / 分子認識 / シグナル伝達 / 膜タンパク質 / 受容体 / 光センサー |
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| Research Abstract |
1-1. 忌避応答光センサー蛋白質、SRIIの機能発現分子メカニズム
(1) 通常1s程度で崩壊する活性型中間体をOctyl-glucoside中、酸性下で2hrまで寿命延長させ、伝達蛋白質との親和性(Kd=5μM)やシップ塩基のpKa(15)を決定した[Biophys.J.2008]。阪大/水谷グループと共同で、機能・構造変化に必須のアミノ酸残基(Tyr174)の変化を検出するため、時間分解紫外共鳴ラマン測定を行っている。
1-2. デュアル光センサー蛋白質、SRIの機能発現メカニズム
(1) 蛋白質の不安定さが解析を行う上で障害であったが、真正細菌S.ruberより極めて安定なSRIを単離し分光学的解析を行った[J.Biol.Chem.2008]。(2)上記SRIを用い低温赤外分光測定を行い。これまで困難であった高波数領域の測定から、イオンポンプとセンシング蛋白質の構造・構造変化の違いを見出した[Biochemistry 2008]。(3)SrSRIのCl^-依存的光反応変化を見出した[論文投稿中]。現在、比較的良質な結晶を得て、結晶構造解析(阪大・今田博士との共同研究)を開始している。さらにSRIの伝達蛋白質(HtrI)の取得にも成功しており。複合体解析も可能になってきた。また、SRI-HtrIを細菌に組み込み、光センシングする系を立ち上げ、機能解析も簡便に行える下地が出来つつある。機能変換に向けて順調に進展している。
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