2008 Fiscal Year Annual Research Report
構成的手法によるシナプス小胞トランスポートソームの実体解明
| Project/Area Number |
20056024
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| Research Institution | Okayama University |
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Principal Investigator |
森山 芳則 Okayama University, 大学院・医歯薬学総合研究科, 教授 (10150658)
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| Keywords | 小胞型グルタミン酸トランスポーター / グルタミン酸 / GABA / VGLUT / 精製 / VGAT / グリシン / 再構成 |
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| Research Abstract |
小胞型神経伝達物質トランスポーターには、小胞型グルタミン酸トランスポーター(vesicular glutamate transporter, VGLUT)、小胞型抑制性アミノ酸トランスポーター(VIAAT)、小胞型抑制性モノアミントランスポーター(VMAT)、小胞型アセチルコリントランスポーター(VAchT)、小胞型ヌクレオチドトランスポーター(VNUT)、ならびに、アスパラギン酸トランスポーター(VEAT)の6種類存在する。本企画は、これらの小胞型神経伝達物質トランスポーターの構造と機能を構成的トランスポートソームの立場で解明することである。構成的トランスポートソームとは、それらのトランスポーターを大量発現精製し、純粋な形で機能をリポソーム中で再構成する。その後、種々の因子を加え、生体における反応を再構成するというものである。本年は、まず、この研究を進めるための基盤を構築した。すなわち、
1、 VNUTとVEATを昨年発見し、それぞれPNASに発表した。
2、 VGLUT VNUT VEATの大量発現精製系を昆虫細胞を用いて確立した。
3、 VCLUT VNUT VEATの大量発現精製系を大腸菌を用いて確立した。この成果は現在投稿中である。
4、 VIAATについても同様に確立した。
以上の成果により、基盤は構築できた。例えば、VNUTに関して言えば、-リットルの大腸菌培養液より40mgもの活性のあるトランスポーターを調製することが可能である。
これは現在において世界のどこも達成できていない。完全なブレークスルー技術となっている。
5、 この技術を駆使して調製したVGLUT及びVNUTを用いて構成的トランスポートソーム研究を進めている。最初の成果として、生理的条件下でVNUTの機能を制御する部位を発見した。現在、この部分の構造を追求中である。
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[Journal Article] Identification of a vesicular nucleotide transporter2008
Author(s)
Sawada, K., Echigo, N., Juge, N., Miyaji. T., Otsuka, M., Omte, H., Yamamoto. A., and Moriyama Y.
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Journal Title
Proc. Natl. Acad. Sci. USA 105
Pages: 5683-5686
Peer Reviewed
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[Journal Article] Presence of aquaporin and V-ATPase on the contractile vacuole of Amoebaproteus2008
Author(s)
Nishihara, E., Yokota, E., Tazaki, A., Orii, E., Katsuhara, M., Kataoka, K., Igarashi, H., Moriyama, Y., Shimmen, T., and Sonobe, S.
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Journal Title
Biol. Cell 100
Pages: 179-188
Peer Reviewed
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[Journal Article] Identification of a vesicular aspartate transporter2008
Author(s)
Miyaji, T., Echigo, N., Hiasa, M., Senoh, S., Omote, H., and Moriyama, Y.
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Journal Title
Proc. Natl. Acad. Sci. USA 105
Pages: 11720-11724
Peer Reviewed
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[Journal Article] Cycloprodigiosin hydrochloride activates the Ras-PI3K-Akt pathway and suppresses protein synthesis inhibition-induced apoptosis in PC12 cells2008
Author(s)
Hawauchi, K., Tobiume, K., Iwashita, K., Inagaki, H., Morikawa, T., Shibukawa, Y., Moriyama, Y., Hirata, H., and Kamatas, H.
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Journal Title
Biosci. Biotechnol. Biochem 72(6)
Pages: 1564-1570
Peer Reviewed
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[Journal Article] Expression and function of TETRAN, anew type of membrane transporter2008
Author(s)
Ushijima, H., Hiasa, M., Namba, T., Hwang, HJ., Hoshino, T., Mima, S., Tsuchiya, T., Moriyama, Y., and Mizushima, T.
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Journal Title
Biochem. Biophys. Res. Commun 374
Pages: 325-330
Peer Reviewed
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[Journal Article] Glutamate transporter-mediated glutamate secretion in the mammalian pineal gland2008
Author(s)
Kim, MH., Uehara, S., Muroyama, A., Hille, BL., Moriyama. Y., and Koh, D-K.
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Journal Title
J. Neuroscience 28
Pages: 10852-10863
Peer Reviewed
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[Journal Article] Vacuolar transport of nicotine is mediated by a novel multidrug and toxiccompound extrusion (MATE) transporter in Nicotiana tabacum2008
Author(s)
Morita, M., Shitan, N., Sawada, Montagu, V. M., K. Inze, D., Rischer, H., Goossens, A., Oksman-Caldentey, K. M., Moriyama, Y., and Yazaki, K.
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Journal Title
Proc. Natl. Acad. Sci. USA. electric version 106(7)
Pages: 2447-2452
Peer Reviewed
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