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2008 Fiscal Year Annual Research Report

皮膚を用いたヒト胸腺organoid形成によるヒトMHC拘束性T細胞誘導の試み

Research Project

Project/Area Number 20200069
Research InstitutionKyoto University

Principal Investigator

濱崎 洋子  Kyoto University, 医学研究科, 助教 (10362477)

Keywords胸腺 / ヒトT細胞誘導 / 表皮細胞
Research Abstract

本研究は、胸腺上皮細胞に発生学的・細胞生物学的に類似した表皮細胞を用いて胸腺様organoidを形成し、これにより目的とするヒトMHCに拘束した機能的T細胞を生成することを目的としている。まず、既知の論文報告(J.Clin.Invest 2005 vol15, p3239)の再現性の確認を兼ねて、市販の支持体(3次元マトリックス)とヒト表皮細胞との共培養条件(サイトカインの組み合わせ.量、細胞数等)を検討した。その結果、様々なパラメータ・細胞の入手先等を変えたものの、少なくとも同様の条件によるorganoidでT細胞の産生は認められなかった。海外で同様のトライアルを行っているグループも類似した結果を発表しており、この方法では再現性よくin vitroでT細胞を分化させることは不可能であると判断した。そこで一度、マテリアルを得やすいマウスの表皮細胞を用いた系に戻り、また支持体を改めて検討することとした。そのためにまず胸腺内に豊富に存在する細胞外マトリックスをPCR・免疫染色法などにより検討を行った。その結果、胸腺上皮細胞が分泌し胸腺内に主要に発現するECMを絞り込むことが出来た。そこで現在これらのECMを組み合わせて人工的3次元支持体に結合させ、表皮細胞と共培養を行うことで胸腺組織に類似したoriganoid構造の形成を行っている。これまでの実験で、ECMの組み合わせ、支持体の表面構造などによりoriganoid形成の効率が顕著に異なることが明らかになった。今後いくつかの組み合わせ候補の中から、最適な条件を確立し、マウスの細胞を用いた培養が立ち上がり次第、この系をヒトの細胞を用いた培養系に移行させる予定である。

  • Research Products

    (3 results)

All 2009 2008 Other

All Journal Article (1 results) (of which Peer Reviewed: 1 results) Presentation (1 results) Remarks (1 results)

  • [Journal Article] Similar and distinct properties of MUPP1 and Patj, two homologous PDZ domain-containing tight-junction proteins.2009

    • Author(s)
      Adachi M, Hamazaki Y, Kobayashi Y, Itoh M, Tsukita S, Furuse M, Tsukita S.
    • Journal Title

      Mol Cell Biol. 29(9)

      Pages: 2372-2389

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] Claudin expression in thymocytes : Implication in T cell development2008

    • Author(s)
      Yoko Hamazaki, Harumi Fujita, Yohei Kawai, Nagahiro Minato
    • Organizer
      International Conference on Lymphopoiesis, T cell Differentiation, and Immune Recognition (ThymUS)
    • Place of Presentation
      San Juan, Puerto Rico
    • Year and Date
      2008-11-12
  • [Remarks]

    • URL

      http://www.med.kyoto-u.ac.jp/J/grad_school/introduction/1205/

URL: 

Published: 2011-06-16   Modified: 2016-04-21  

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