2010 Fiscal Year Annual Research Report
インフルエンザウイルスゲノム機能の制御に関わる宿主因子の同定と機能解析
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20249025
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| Research Institution | University of Tsukuba |
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Principal Investigator |
永田 恭介 筑波大学, 大学院・人間総合科学研究科, 教授 (40180492)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
竹内 薫 筑波大学, 大学院・人間総合科学研究科, 准教授 (00192162)
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| Keywords | ウイルス / 宿主因子 / 分子生物学 / ゲノム複製 / 転写 / RNA依存性RNAポリメラーゼ / インフルエンザウイルス / 酵母レプリコン系 |
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| Research Abstract |
本研究の目的は、インフルエンザウイルスのゲノム複製と転写に関わる宿主因子を同定し、それらの機能を明らかにすることである。
上記の目的のために、我々はインフルエンザウイルスゲノムの複製と転写を再現できる試験管内系を確立し、その解体と再構成により、宿主因子の探索と機能解析を進め、数種のウイルスRNA合成促進宿主因子を同定した。今年度は、プライマー非依存的な複製反応に関わる宿主因子IREF(Influenza virus REplication Factor)-1の機能解析をすすめ、IREF-1はminichromosome maintenance(MCM)であり、MCM存在下でウイルスポリメラーゼはProcessiveなRNA合成を行ない、全長のウイルスゲノムを複製することが明らかになった。複製反応に関わる第2の宿主因子としてIREF-2を同定した。IREF-2は、複製中間体であるcRNAを鋳型としたウイルスゲノム複製を特異的に促進する宿主因子であり、鋳型極性を認識する活性をもつ因子であった。
一方、ウイルス側因子に関する解析でも進展があった。ウイルスゲノムに結合していないNPは、MCMと相加的にウイルスゲノム複製を促進することが明らかになった。また、この活性にはNPのRNA結合活性は不要であり、NPはPAを標的とするMCMとは異なる作用機構でゲノム複製反応を促進することが示唆された。複製された子孫ウイルスRNPの細胞内動態の可視化観察により、複製されたウイルスゲノムの動態に関わる宿主のタンパク質を同定した。
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