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2008 Fiscal Year Annual Research Report

難治性根尖性歯周炎に関わるバイオフィルムの遺伝子工学的制御法と科学的診断法の開発

Research Project

Project/Area Number 20249076
Research InstitutionOsaka University

Principal Investigator

恵比須 繁之  Osaka University, 大学院・歯学研究科, 教授 (50116000)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 野杁 由一郎  大阪大学, 歯学部附属病院, 講師 (50218286)
薮根 敏晃  大阪大学, 大学院・歯学研究科, 助教 (90423144)
阿座上 弘行  山口大学, 農学部, 准教授 (40263850)
Keywords難治性根尖性歯周炎 / 感染根管 / バイオフィルム / 根尖孔外 / Porphyromonas gingivalis / 遺伝子工学 / ゲノムDNA / modified Robbins device
Research Abstract

本研究では,4年間で100症例の難治性根尖性歯周炎症例より根尖孔外バイオフィルム試料を採取するとともに、感染根管症例から根管内バイオフィルム試料を採取し、それぞれの試料について既に確立した遺伝子解析法によりバイオフィルム細菌を同定後その構成比率を解析する予定である。本年度は,数症例のバイオフィルムサンプルより,16S rRNA遺伝子を増幅し,プラスミドライブラリーを作製した。現在,シークエンサーにより細菌を同定中である。一方で,研究代表者らが根尖性歯周炎の難治化に強い関連性があることを報告したPorphyromonas gingivalisを用いて,バイオフィルム系と浮遊系で発現遺伝子を経時的に解析し,その発現遺伝子の相違を検索するため,まず各増殖過程における浮遊系のP.gingivalis細胞の遺伝子発現を検索した。誘導期,対数期,静止期,死滅期のそれぞれの過程で,数種の遺伝子において発現強度が異なり,その中には他の細菌種でバイオフィルム形成との関連が示唆されている遺伝子が含まれていると推察された。現在,マイクロアレイ法に必要なゲノムDNA量を回収するため,バイオフィルム形成モデルに改良を加え,その採集量の確認実験を行った上で経時的にDNAを抽出し,遺伝子をプロファイリングすることにより,浮遊系のP. gingivalis細胞で強発現していた遺伝子との関係を検索中である。
他方で,根尖性歯周炎罹患歯の60根管に対し,感染根管治療時の拡大終了後にEr:YAGレーザーを照射し,その有用性を細菌学的および組織化学的に評価した。レーザー照射群42試料において,照射前には15試料から細菌が同定されたが,照射後はその内9試料では細菌が検出されなかった。照射前に検出された平均細菌数は37.7CFU/根管で,照射後も細菌が検出された6試料の平均細菌数は1.7CFU/根管で有意に低下した。また,非照射の1サイズ拡大後の試料の細菌数に比べ,照射後の残存性細菌数は,有意に低かった。これらより,根管内へのレーザー照射は,残存細菌の有効なコンドロール法の1つであることが示唆された。

  • Research Products

    (12 results)

All 2009 2008

All Journal Article (4 results) (of which Peer Reviewed: 1 results) Presentation (8 results)

  • [Journal Article] Quorum sensing シグナル物質の類似化合物が Porphyromonas gingivalis のパイオフィルム形成に及ぼす影響の検索2009

    • Author(s)
      朝日陽子, ら
    • Journal Title

      Bacterial Adherence & Biofilm 22(印刷中)

  • [Journal Article] 歯周病関連細菌 Eikenella corrodens のオートインデューサーがバイオフィルム形成に関与する2009

    • Author(s)
      阿座上弘行, ら
    • Journal Title

      Bacterial Adherence & Biofilm 22(印刷中)

  • [Journal Article] 歯周病関連細菌 Eikenella corrodens はゲノム再編により上皮細胞への付着を高める2009

    • Author(s)
      仲行あゆみ, ら
    • Journal Title

      Bacterial Adherence & Biofilm 22(印刷中)

  • [Journal Article] Effects of Er YAG laser irradiation on biofilm-forming bacteria associated with endodontic pathogens in vitro2008

    • Author(s)
      Noiri Y, et al.
    • Journal Title

      Journal of Endodontics 34

      Pages: 826-829

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] クオラムセンシングをターゲットとしたバイオフィルム阻害剤の開発2009

    • Author(s)
      阿座上弘行, ら
    • Organizer
      日本農芸化学会2009年度大会(シンポジウム)
    • Place of Presentation
      福岡
    • Year and Date
      2009-03-28
  • [Presentation] 歯周病関連細菌 Eikenella corrodens のデンタルプラークからの高病原化株の検出2009

    • Author(s)
      松永哲郎, ら
    • Organizer
      第82回日本細菌学会総会
    • Place of Presentation
      名古屋
    • Year and Date
      2009-03-12
  • [Presentation] 感染歯質除去後の象牙室内残存細菌に対しEr:YAGレーザーを用いた修復処置2008

    • Author(s)
      薮根敏晃, ら
    • Organizer
      第129回日本歯科保存学会秋季学術大会
    • Place of Presentation
      富山
    • Year and Date
      2008-11-07
  • [Presentation] オーラルバイオフィルムの制御を目指して2008

    • Author(s)
      恵比須繁之
    • Organizer
      第27回日本小児歯科学会近畿地方大会
    • Place of Presentation
      大阪
    • Year and Date
      2008-10-19
  • [Presentation] Refractory periapical periodontitis and biofilms-essential strategy for treatment of refractory endodontic pathogen2008

    • Author(s)
      恵比須繁之
    • Organizer
      2008 SINO-JAPANESE CONFERENCE ON STOMATOLOGY
    • Place of Presentation
      西安・中国
    • Year and Date
      2008-09-28
  • [Presentation] Effects of various antibiotics on Porphyromonas gingivalis biofilms2008

    • Author(s)
      Maezono H, et al.
    • Organizer
      86^<th> International Association for Dental Research
    • Place of Presentation
      Toronto・Canada
    • Year and Date
      2008-07-05
  • [Presentation] クオラムセンシング関連物質が Porphyromonas gingivalis のバイオフィルム形成に及ぼす影響の検索2008

    • Author(s)
      朝日陽子, ら
    • Organizer
      第128回日本歯科保存学会春季学術大会
    • Place of Presentation
      新潟
    • Year and Date
      2008-06-05
  • [Presentation] バイオフィルム感染症の治療法としてのクオラムセンシング阻害戦略2008

    • Author(s)
      恵比須繁之
    • Organizer
      国際歯周内科学研究会第6回総会
    • Place of Presentation
      福岡
    • Year and Date
      2008-04-20

URL: 

Published: 2011-06-16   Modified: 2016-04-21  

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