2009 Fiscal Year Annual Research Report
動脈硬化性疾患の発症に直結する新規バイオマーカーの発見と早期診断・治療法の開発
Project/Area Number |
20300232
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Research Institution | National Cardiovascular Center Research Institute |
Principal Investigator |
池田 康行 National Cardiovascular Center Research Institute, 病因部, 室長 (90176107)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
高木 敦子 国立循環器病センター研究所, 薬理部, 室長 (90179416)
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Keywords | リポ蛋白リパーゼ / 高トリグリセリド血症 / 動脈硬化症 / バイオマーカー / メタボリックシンドローム / マクロファージ |
Research Abstract |
【研究目的】微量の血液検体で、多検体のスクリーニングを可能にする動脈硬化の発症・進展を予測できるバイオマーカー蛋白の定量法(サンドイッチELISA法)を確立し、動脈硬化性疾患の早期診断・進展予防を目指す。 【少量の血液検体からバイオマーカー蛋白を特異的に定量できるサンドイッチELISA(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay:酵素免疫測定法)系の確立(池田/高木)】我々は、動脈硬化の発症に直結する新規バイオマーカー蛋白質をヒト流血中より発見し、分離精製した。精製蛋白をマウスに免疫し、本蛋白に対して、特異的なモノクローナル抗体を2種類作成した。それぞれのモノクローナル抗体は、本蛋白に対して、異なる抗原部位を認識することができる。それ故、バイオマーカー蛋白をサンドイッチすることが可能となった。モノクローナル抗体Aを96穴プレイトに結合させる固定化抗体として使用し、他のモノクローナル抗体Bを酵素(HRP, horseradish peroxidase)標識し、サンドイッチELISA法の開発をおこなっている。 【健常人および動脈硬化既往歴者の血液におけるバイオマーカー蛋白の濃度定量(池田/高木)】前年度、バイオマーカー蛋白の検出をウエスタンブロット法にて、健常者2例と動脈硬化症者2例の解析を行ったが、本年度は、検体数を増やして、更なる解析を行った。健常者12名および動脈硬化既往歴者4名からバイオマーカー蛋白を本蛋白に対するモノクローナル抗体カラムにて精製し、SDS電気泳動およびウエスタンブロット法により解析した。その結果、健常者からは、この蛋白はほとんど検出されなかったが、動脈硬化既往歴者において、十分量のバイオマーカー蛋白が検出された。現在、これら健常者および動脈硬化既往歴者のバイオマーカー蛋白をモデル系として、サンドイッチELISA法により、定量できる系の開発を行っている。
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Research Products
(3 results)
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[Journal Article]2009
Author(s)
高木敦子、池田康行
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Journal Title
広範囲 血液・尿化学検査 免疫学的検査-その数値をどう読むか[第7版]IV.生化学的検査[2]A.脂質関係 日本臨床67巻 増刊号(リポ蛋白質リパーゼ(LPL)・肝性トリグリセリドリパーゼ(HTGL).)
Pages: 443-450(部分執筆)
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