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2008 Fiscal Year Annual Research Report

タンパク質工学的手法による有機溶媒耐性酵素の作成

Research Project

Project/Area Number 20310139
Research InstitutionOsaka Prefecture University

Principal Investigator

荻野 博康  Osaka Prefecture University, 工学研究科, 准教授 (80233443)

Keywords酵素 / 有機溶媒耐性 / タンパク質工学 / リパーゼ / 分子進化工学 / 酸化還元酵素 / ブロモペルオキシダーゼ
Research Abstract

日本を始めとする先進国における化学産業はバルク製品の製造から、より付加価値の高いファインケミカル製品の製造に移行している。これらのファインケミカル製品の製造の触媒として基質特異性の高い酵素を利用することは、環境調和型の化学プロセスを構築する上で大変有用である。しかしながら、ファインケミカル製品の多くは難水溶性の化合物であり、高効率に製造するために用いられる有機溶媒存在下では酵素は容易に変性し、その触媒機能を喪失する。本研究では、酵素の有機溶媒耐性の要因を検討し、有機溶媒耐性生体触媒の創製に必要な知見を得ると共に、それらの知見を基にして、有機溶媒耐性生体触媒を創製する。
本年度は、まず、有機溶媒耐性微生物Pseudomonas aeruginosa LST-03株由来のLST-03リパーゼ遺伝子にランダム変異を誘発し、有機溶媒耐性の異なるリパーゼの取得を試みた。その結果、有機溶媒耐性が向上した数種の変異リパーゼの取得に成功した。また、新たな有機溶媒耐性酵素の創製を目指し、補酵素を必要としない酸化還元酵素遺伝子の取得を試みた。具体的には、高価な補酵素等を必要とせずに、反応性の高いハロゲン化中間体を合成する酸化還元酵素の1つであるStreptomyces aureofaciens ATCC 10762株由来の非金属型プロモペルオキシダーゼを選択し、当該遺伝子をクローニングや異種宿主での発現系を構築した。

  • Research Products

    (19 results)

All 2010 2009 2008

All Journal Article (3 results) (of which Peer Reviewed: 3 results) Presentation (15 results) Patent(Industrial Property Rights) (1 results)

  • [Journal Article] Screening, purification, and characterization of a leather-degrading protease2008

    • Author(s)
      H. Ogino, et al.
    • Journal Title

      Biochemical Engineering Journal 38

      Pages: 234-240

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Characterization of recombinant glyoxylate reductase from thermophile Thermus thermophilus HB272008

    • Author(s)
      H. Ogino, et al.
    • Journal Title

      Biotechnology Progress 24

      Pages: 321-325

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Refolding of a recombinant organic solvent-stable lipase, which is overexpressed and forms an inclusion body, and activation with Iipase-specific foldase2008

    • Author(s)
      H. Ogino, et al.
    • Journal Title

      Biochemical Engineering Journal 40

      Pages: 507-511

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] 有機溶媒耐性酵素の開発2010

    • Author(s)
      荻野博康
    • Organizer
      近畿大学応用化学セミナー
    • Place of Presentation
      東大阪
    • Year and Date
      2010-06-12
  • [Presentation] 高活性・高耐久性なアスパルテーム前駆体合成酵素2009

    • Author(s)
      荻野博康
    • Organizer
      日本化学会第89春季年会
    • Place of Presentation
      船橋
    • Year and Date
      2009-03-29
  • [Presentation] Development of high permanence enzymes for environmentally friendly chemical processes2009

    • Author(s)
      H. Ogino
    • Organizer
      The 4th International Symposium on Material Cycling Engineering
    • Place of Presentation
      Sakai, Japan
    • Year and Date
      2009-03-11
  • [Presentation] Development of organic solvent-stable enzymes2008

    • Author(s)
      H. Ogino
    • Organizer
      The 14th Symposium of Young Asian Biochemical Engineers' Community (YABEC2008)
    • Place of Presentation
      Tokyo, Japan
    • Year and Date
      20081131
  • [Presentation] Enhancement of aspartame precursor synthesis activity of an organic solvent-stable protease2008

    • Author(s)
      H. Ogino
    • Organizer
      The 14th Symposium of Young Asian Biochemical Engineers' Community (YABEC2008)
    • Place of Presentation
      Tokyo, Japan
    • Year and Date
      20081131
  • [Presentation] 有機溶媒耐性酵素の開発2008

    • Author(s)
      荻野博康
    • Organizer
      イノベーション・ジャパン2008-大学見本市-
    • Place of Presentation
      東京
    • Year and Date
      20080916-20080918
  • [Presentation] 分子進化工学的手法によるLST-03リパーゼの有機溶媒耐性の向上2008

    • Author(s)
      荻野博康
    • Organizer
      酵素工学研究会30年記念シンポジウム
    • Place of Presentation
      木更津
    • Year and Date
      2008-11-13
  • [Presentation] Enhancement of the organic solvent-stability of a lipase from Pseudomonas aeruginosa LST-03 by directed evolution2008

    • Author(s)
      T. Kawata and H. Ogino
    • Organizer
      The Tenth Japan-China-Korean Joint Symposium on Enzyme Engineering
    • Place of Presentation
      Busan, Korea
    • Year and Date
      2008-11-03
  • [Presentation] Development of an aspartame precursor synthesis enzyme which is active and stable in the presence of organic solvents2008

    • Author(s)
      H. Ogino
    • Organizer
      The Tenth Japan-China-Korean Joint Symposium on Enzyme Engineering
    • Place of Presentation
      Busan, Korea
    • Year and Date
      2008-11-03
  • [Presentation] 分子進化工学的手法により有機溶媒耐性が向上したLST-03リパーゼの取得2008

    • Author(s)
      河田拓也, 荻野博康
    • Organizer
      化学工学会 第40回秋季大会
    • Place of Presentation
      仙台
    • Year and Date
      2008-09-24
  • [Presentation] 高耐久性アスパルテーム前駆体合成酵素の開発2008

    • Author(s)
      荻野博康
    • Organizer
      日本化学会第3回バイオ関連化学合同シンポジウム
    • Place of Presentation
      横浜
    • Year and Date
      2008-09-19
  • [Presentation] 有機溶媒耐性酵素の開発2008

    • Author(s)
      荻野博康
    • Organizer
      イノベーション・ジャパン2008-大学見本市-NEDO技術開発機構ショートプレゼンテーション
    • Place of Presentation
      東京
    • Year and Date
      2008-09-17
  • [Presentation] 有機溶媒耐性酵素の開発2008

    • Author(s)
      荻野博康
    • Organizer
      イノベーション・ジャパン2008-大学見本市-新技術説明会
    • Place of Presentation
      東京
    • Year and Date
      2008-09-16
  • [Presentation] 高活性・高安定性アスパルテーム前駆体合成酵素の開発2008

    • Author(s)
      荻野博康, 土山祥太郎
    • Organizer
      化学工学会九州支部沖縄大会
    • Place of Presentation
      那覇
    • Year and Date
      2008-08-08
  • [Presentation] His-tagを付与した耐熱性ブロモペルオキシダーゼの性質2008

    • Author(s)
      知名秀泰, 荻野博康
    • Organizer
      化学工学会九州支部沖縄大会
    • Place of Presentation
      那覇
    • Year and Date
      2008-08-08
  • [Patent(Industrial Property Rights)] 変異型プロテアーゼ及び該プロテアーゼを用いたペプチド合成方法2008

    • Inventor(s)
      荻野博康
    • Industrial Property Rights Holder
      公立大学法人大阪府立大学
    • Industrial Property Number
      特許、特願2008-217928
    • Filing Date
      2008-08-27

URL: 

Published: 2010-06-11   Modified: 2016-04-21  

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