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2010 Fiscal Year Annual Research Report

キメラ菌体によるパクテリアべん毛モーターのエネルギー変換・情報伝達機構の解明

Research Project

Project/Area Number 20370056
Research InstitutionTohoku University

Principal Investigator

石島 秋彦  東北大学, 多元物質科学研究所, 教授 (80301216)

Keywordsバクテリア / 回転計測 / モータータンパク / 温度 / トルク
Research Abstract

バクテリアべん毛モーターは,1菌体に4~5本のべん毛モーターを有し,それらの回転方向の転換を同期させて起こすことによりよりよい環境に向かって遊泳する.その回転方向転換は受容体からの情報を細胞内部のリン酸化タンパクの状態を変換し,各モーターに伝えることで起こると考えられているが,その詳細はまだよくわかっていない.
我々は,高速度カメラを用いて,複数のモーターの回転をサブ秒,数度の分解能で同時に計測するシステムを開発した.その結果,各モーターの回転方向の転換は同期しており,さらにそのタイミングは受容体に近いモーターから起こり,サブ秒の時間遅れで次のモーターに伝わって起こることがわかった.これらの知見は,従来考えられてきた解釈と異なり,高分解能計測システムにより明らかになったものである.これらの結果は,Biophysical Journalに掲載予定である.
また,細胞外部からの刺激への応答を明らかにするために,caged化合物を作成し,水銀ランプ照射による応答を計測した.その結果,水銀ランプ照射により,モーターの回転方向は,CCW(反時計回り)となり,数十秒後に,また元の状態に戻った.この結果は,caged化合物が有効に機能していることを示唆する.さらに,レーザーによる局所照射により,高時間・空間分解能の刺激システムを開発し,細胞の応答を計測した.
また,モーターの回転を直接計測することをめざし,モーター基部体構成タンパク質にGFPを融合させ,その偏光からモーター基部体の回転を直接計測するシステムを構築した.GFPの偏光は蛍光を偏光ビームスプリッターで分割し,同一カメラに投影することにより,計測を試みた.その結果,GFPのS,P偏光の強度がステージの回転とともに排他的に変化することに成功した.

  • Research Products

    (11 results)

All 2010

All Journal Article (4 results) (of which Peer Reviewed: 3 results) Presentation (7 results)

  • [Journal Article] Verification of Single-Molecule imaging and Single-Molecule Measurements2010

    • Author(s)
      Akihiko Ishijima, Hajime Fukuoka, Yuichi Inoue
    • Journal Title

      Journal of Robotics and Mechatronics

      Volume: 5 Pages: 368-578

  • [Journal Article] Adhesion Effects of a Guanidinium Ton Appended Dendritic "Molec ular Glue" on the ATP-Driven Sliding Motion of Actomyosin.2010

    • Author(s)
      Okuro, K., Kinbara, K., Takeda, K., Inone, Y., Ishijima, A., Aida, T.
    • Journal Title

      Angew Chem Int Ed Engl.

      Volume: 49 Pages: 3030-3033

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Thermosensing function of the Escherichia coli redox sensor Aer2010

    • Author(s)
      Nishiyama, S., Ohno, S., Ohta, N., Inoue, Y., Fukuoka, H., Tshijima, A., Kawagishi, I.
    • Journal Title

      J Bacteriol

      Volume: 192 Pages: 1740-1743

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Two methods of temperature control for single-molecule measurements2010

    • Author(s)
      Matthew A.B.Baker, Yuichi Inoue, Kuniaki Takeda, Akihiko Ishijima, Richard M.Berry
    • Journal Title

      European Biophysics Journal

      Volume: 5 Pages: 651-660

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] Synchronous regulation of multiple flagellar motors on a single Escherichia coli cell2010

    • Author(s)
      Hajime Fukuoka, Shun Terasawa, Yuichi Innue, Hiroto Takahashi, Akihiko Ishijima
    • Organizer
      第48回日本物物理学会年会
    • Place of Presentation
      仙台市
    • Year and Date
      20100920-20100922
  • [Presentation] Analysis of torque steps of the bacterial flagellar motor indused by heating.2010

    • Author(s)
      Yuichi Tnoue, Hajime Fukuoka, Akihiko Ishijima.
    • Organizer
      第48回日本生物物理学会年会
    • Place of Presentation
      仙台市
    • Year and Date
      20100920-20100922
  • [Presentation] Construction of the optical system detecting the orientation of molecule from the polarization of fluorescence.2010

    • Author(s)
      Takahiro Shimizu, Hajime Fukuoka, Yuichi Inone, Hiroto Takahashi, Akihiko Ishijima.
    • Organizer
      第48回日本生物物理学会年会
    • Place of Presentation
      仙台市
    • Year and Date
      20100920-20100922
  • [Presentation] Measurement of rotation of multiple flagellar me tore on a single cell with chemotactic substrate2010

    • Author(s)
      Takashi Sagawa, Hajime Fukuoka, Hiroto Takahashi, Yu Kikuchi, Yuichi Inoue, Akihiko Ishijima
    • Organizer
      第48回日本生物物理学会年会
    • Place of Presentation
      仙台市
    • Year and Date
      20100920-20100922
  • [Presentation] Measurement of rotational behavior of flagell ar motors in E.cob induced by caged serine.2010

    • Author(s)
      Yu Kikushi, Hajime Fukuoka, Yuichi Inoue, Hiroto Takaha shi, Takahiro Muraoka, Kazushi Kimbara, Akihiko Ishijima
    • Organizer
      第48回日本生物物理学会年会
    • Place of Presentation
      仙台市
    • Year and Date
      20100920-20100922
  • [Presentation] Single molecule measurement of actomyosin motors at low temperature.2010

    • Author(s)
      Hiroyasu Aizawa, Yuichi Inoue, Akihiko Ishijima.
    • Organizer
      第48回日本物耀学飾会
    • Place of Presentation
      仙台市
    • Year and Date
      20100920-20100922
  • [Presentation] Direct observation of carbon nanotube in solution by surfactant-terminated fluorescent labeling.2010

    • Author(s)
      Hiroshi Matsutaka, Takeru Okada, Yuichi Inoue, Hajime Fukuoka, Shahbaz Khan, Shige H.Yoshimura, Akihiko Ishijima
    • Organizer
      第48回日本生物物理学会年会
    • Place of Presentation
      仙台市
    • Year and Date
      2010-09-20

URL: 

Published: 2012-07-19  

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