2009 Fiscal Year Annual Research Report
疎水性糖タンパク質の効率的な化学合成法の確立とサポシン合成への応用
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20380069
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| Research Institution | Tokai University |
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Principal Investigator |
北條 裕信 Tokai University, 工学部, 教授 (00209214)
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| Keywords | 難溶性糖ペプチド / O-acyl isopeptide / Saposin |
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| Research Abstract |
サポシンはスフィンゴ糖脂質の代謝に関わり、その機能不全により重篤な神経疾患が引き起こされる糖タンパク質である.この病理メカニズムを解明するため、我々はその化学合成を試みている。予備実験ではサポシンCの配列を2つに分割し、N末端とC末端側のペプチドを固相合成し、セグメント縮合を試みた。しかし、N末端セグメントは疎水性アミノ酸を多く含むためか難溶性であり縮合は進行しなかった。
この問題を解決し、一般的な難溶性の糖タンパク質合成法を確立するため、本研究では、N末端側のチオエステルの可溶化を促進してセグメント縮合を可能とする方法を検討している。本年度は、昨年度試みたペプチド配列中の一部のアミド結合を側鎖水酸基との間のエステル結合に置き換えて、ペプチドの溶解性を向上させる方法を再検討した。塩基性条件を多用するFmoc法ではエステル結合が固相合成の条件で徐々に切断されてしまうことが判明しため、本年度は、酸性から中性条件で反応を行うことができるBoc法を用いての合成を行った。その結果、比較的よい純度で目的物を得ることができた。そこで得られたN末端セグメントをC末端側と種々条件下で縮合したところ、わずかながら目的とするサポシンを得ることに成功した。セグメント縮合途上、還元剤の作用によりエステル結合がアミノ基に転位して天然のアミド結合へと変換されることも確認した。今後この方法によりサポシンCの大量合成を行う予定である。またジスルフィド架橋構造が天然物通りになっていることを確認した後、生物活性測定を行う予定である。
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Research Products
(11 results)
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[Journal Article] Direct binding of gangliosides to Helicobacter pylori vacuolating cytotoxin (VacA) neutralizes its toxin activity.2010
Author(s)
A.Wada, M.Hasegawa, P.-F.Wong, E.Shirai, N.Shirai, Li-Jing Tan, R.Llanes, H.Hojo, E.Yamasaki, A.Ichinose, Y.Ichinose, M.Senba.
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Journal Title
Peer Reviewed
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