2008 Fiscal Year Annual Research Report
| Project/Area Number |
20390205
|
|---|
| Research Institution | Niigata University |
|---|
Principal Investigator |
青柳 豊 Niigata University, 医歯学系, 教授 (00142266)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
内海 利男 新潟大学, 自然科学系, 教授 (50143764)
大越 章吾 新潟大学, 医歯学系, 講師 (70231199)
須田 剛士 新潟大学, 医歯学系, 助教 (10361916)
|
|---|
| Keywords | フコース転移酵素 / 肝細胞癌 / フコシル化AFP / FUT8 / 糖鎖 |
|---|
| Research Abstract |
α1-6フコース転移酵素(FUT8)は、肝癌の生物学的悪性度の指標として臨床応用されているフコシル化AFPに関与しているが、悪性度とフコシル化AFPの詳細な分子機構の解明はなされていない。肝癌細胞を用いてRNAiの手法によりFUT8発現を抑制し、細胞増殖や細胞浸潤能の変化に対する基礎的検討を行なった。【結果】肝癌細胞株であるKYN2細胞、HepG2細胞、PLC/PRF/5細胞と膵癌細胞株であるASPC1細胞にTransientにFUT8 siRNAを48時間導入しFUT8 mRNA発現量をリアルタイムPCRで確認した。Control SiRNA導入における発現量を100%として算出した結果、KYN2細胞、HepG2細胞、PLC/PRF/5細胞、ASPC1細胞でそれぞれ5.9±0.9%、23.7±6.6%、30.2±2.9%、5.3±0.1%にFUT8 mRNA発現が抑制された。更に、KYN2細胞のFUT8 siRNA導入細胞培養上清のフコシル化AFP分画の有意な低下(p=0.0072)を認めた。FUT8遺伝子発現抑制による細胞増殖能への影響について、Control SiRNA導入細胞と比較した結果、4種の細胞株いずれも有意な細胞数の変化を認めなかった。また、細胞浸潤および遊走能をマトリゲルアッセイ、スクラッチアッセイで検討したが、いずれもControl SiRNA導入細胞との有意な差は認めなかった。【考察】今回用いたRNAiの手法で、明瞭なFUT8遺伝子発現抑制を認めたが、各種細胞株で細胞増殖能や浸潤遊走能の有意な変化は確認できなかった。今後、FUT8遺伝子発現抑制による網羅的な遺伝子発現の変化と糖鎖構造の変化を引き続き確認する予定である。
|
Research Products
(16 results)
