2009 Fiscal Year Annual Research Report
口蓋裂発症の過程におけるソニックヘッジホッグシグナルの関与
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20390510
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| Research Institution | Tokyo Medical and Dental University |
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Principal Investigator |
井関 祥子 Tokyo Medical and Dental University, 医歯学総合研究科, 教授 (80251544)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
天笠 光雄 東京医科歯科大学, 医歯学総合研究科, 教授 (00014332)
須田 直人 東京医科歯科大学, 医歯学総合研究科, 講師 (90302885)
佐藤 豊 東京医科歯科大学, 医歯学総合研究科, 助教 (90361716)
太田 正人 東京医科歯科大学, 医歯学総合研究科, 助教 (70313228)
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| Keywords | Shh / 口蓋裂 / 定量的ISH / MFCS4 |
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| Research Abstract |
マウス発生過程においてソニックヘッジホッグ(Shh)の咽頭領域特異的な発現を誘導する組織特異的エンハンサーMFCS4の欠失マウスと、Shhコーディング領域欠失マウスのコンパウンドヘテロにおいて、100%の確率で口蓋裂が生じる。これまでに、この原因が舌の形成不全である可能性が高いことを示した。組織学的解析により、野生型マウスと比較して、コンパウンドヘテロ個体では、上縦舌筋とオトガイ舌筋の形成が劣ることを発見した。
また、発生過程にある咽頭領域の実際のShhの発現量を検討するために、ShhおよびShhのシグナルを反映されると考えられるGli1転写因子の定量的in situ hybridizatnionを検討した。それぞれの遺伝子のcDNA領域から約5領域をプローブ領域として20塩基選定し、標識cDNAをプローブとしたところ、Shhでは特異的なシグナルが認められたが、Gliプローブでは非特異的なシグナルが認められ、今後Shhの発現の強度を野生型とコンパウンドヘテロで解析中であり、Shhのシグナルを反映する別の分子、Patched1のin situ hybridizationにおけるシグナルを検討中である。これによって、いわゆる遺伝子のハプロ欠失が、分子の発現としてmRNAレベルでも半分の量になっているか、それとも何らかの調節が遺伝子発現レベルで行われているのかが明らかとなる。
ヒトMFCS4領域が口蓋裂発症に関与しているかを検討するために、口蓋裂患者のMFCS4領域のDNA配列を検討している。現在までに報告されている一塩基多型以外に22の一塩基多型を発見し、その一部は患者のみに認められるもので、これらの一塩基多型が口蓋裂発症に関与しているかを今後検討する。
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