三日熱マラリア原虫感染赤血球表面分子PvSTPの集団遺伝学解析

2009 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 20406009
• Research Institution: Nagasaki University
• Principal Investigator: 金子 修 Nagasaki University, 熱帯医学研究所, 教授 (50325370)
• Keywords: 感染症 / 寄生虫 / 遺伝子多型 / 抗原変異

Research Abstract

熱帯熱マラリア原虫の感染赤血球は未感染の正常赤血球とロゼット形成を起こし、病原性を高める。一方、三日熱マラリア原虫もロゼット形成を起こし、病原性との関連が予想されるが、詳細はあきらかでない。我々は最近、熱帯熱マラリア原虫と三日熱マラリア原虫の感染赤血球表面に発現しているSURFIN/PvSTPという新規リガンド候補分子を同定した。本研究では流行地の三日熱マラリア原虫集団を用いてPvSTP(PvSTP1とPvSTP2)に対する選択圧を分子生物学的・集団遺伝学的に明らかにすることを目的とした。本年度も、タイと中国のマラリア流行地から三日熱マラリア原虫を採集し、採集した三日熱マラリア原虫から間接蛍光抗体法(IFA)用のスメア、DNA、RNAを調製した。PvSTP1について中国由来13株の塩基配列を直接シーケンス法で決定した。複数のアレルが重複感染しているサンプルが39あったため、プラスミドヘクローニングし、塩基配列を決定する準備を整えた。それともに、中立遺伝子座として13株についてASDLの配列を決定した。PvSTP2のPCR増幅が良くないため、条件検討を行った。昨年度に作成した抗体の反応性が良くなかったため、今年度はVAR領域に対して組換えタンパク質を作成し、マウス抗血清を作成するのに加え、ウサギペプチド抗体も作成した。そのうちPvSTP2に対するペプチド抗体による間接蛍光抗体法で三日熱マラリア原虫の赤血球細胞質内に非常に明確な反応が見られ、シュフナー斑点と良い共局在を示すことが分かった。定量RT-PCRにより、PvSTP1に比べてPvSTP2が50-100倍程度高く転写されていることを見出した。

Research Products

• [Presentation] Plasmodium SURFIN : evolution, polymorphism, and human sera reactivity (2009)
  • Author(s): Kaneko O
  • Organizer: The 4th Nagasaki Symposium on Tropical and Emerging Infectious Diseases
  • Place of Presentation: 長崎、長崎大学良順会館
  • Year and Date: 20091126-20091128
• [Presentation] Variation in the rhophl/clag multigene family of Plasmodium falciparum from Thai field isolates (2009)
  • Author(s): Alexandre JSF, Kaewthamasorn M, Yahata K, Nakazawa S, Torii M, Sattabongkot J, Udomsangpetch R, Kaneko O
  • Organizer: 第50回日本熱帯医学会大会
  • Place of Presentation: 沖縄(宜野湾市)、沖縄コンベンションセンター
  • Year and Date: 20091023-20091024
• [Presentation] Diversity of Plasmodium falciparum SURFIN4.2 in Thai field isolates (2009)
  • Author(s): Kaewthamasorn M, Yahata Y, Alexandre JSF, Nakazawa S, Torii M, Sattabongkot J, Udomsangpetch R, Kaneko O
  • Organizer: 第50回日本熱帯医学会大会
  • Place of Presentation: 沖縄(宜野湾市)、沖縄コンベンションセンター
  • Year and Date: 20091023-20091024
• [Presentation] Polymorphism patterns of Plasmodium vivax subtelomeric transmembrane protein 1(PvSTPl)among China field isolates (2009)
  • Author(s): Zhu XT, Kaewthamasorn M, YahataK, Cao YM, Kaneko O
  • Organizer: 第50回日本熱帯医学会大会
  • Place of Presentation: 沖縄(宜野湾市)、沖縄コンベンションセンター
  • Year and Date: 20091023-20091024
• [Presentation] Positive diversifying selection on Plasmodium falciparum SURFIN4.1 (2009)
  • Author(s): Xangsayarath P, Kaewthamasorn M, Yahata K, Nakazawa S, Kaneko O
  • Organizer: 第50回日本熱帯医学会大会
  • Place of Presentation: 沖縄(宜野湾市)、沖縄コンベンションセンター
  • Year and Date: 20091023-20091024
• [Presentation] Positive diversifying selection on Plasmodium falciparum SURFIN4.1 (2009)
  • Author(s): Xangsayarath P, Kaewthamasorn M, Yahata K, Nakazawa S, Kaneko O.
  • Organizer: The 3rd National Health Research Forum to Support the health research systems strengthening in Lao PDR
  • Place of Presentation: チャンパーサック、ラオス
  • Year and Date: 20091002-20091003
• [Presentation] マラリア原虫の赤血球侵入・感染赤血球表面の生物学 (2009)
  • Author(s): 金子修
  • Organizer: 第17回分子寄生虫学ワークショップ
  • Place of Presentation: 群馬県(草津)、草津セミナーハウス
  • Year and Date: 20090807-20090809
• [Presentation] Plasmodium vivax subtelomeric transmembrane protein 1(PvSTP1), a homolog of P.falciparum SURFIN ; polymorphism and human sera reactivity. (2009)
  • Author(s): Zhu XT, Sungkapong T, Kaewthamasorn M, Culleton R, Tachibana M, Tsuboi T, Torii M, Yahata K, Cao YM, Chotivanch K, Kaneko O
  • Organizer: Vivax Malaria Research III : 2009 and beyond
  • Place of Presentation: パナマ、パナマ共和国
  • Year and Date: 20090524-20090528