2009 Fiscal Year Annual Research Report
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20570143
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| Research Institution | Kawasaki Medical School |
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Principal Investigator |
西松 伸一郎 Kawasaki Medical School, 医学部, 講師 (20222185)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
濃野 勉 川崎医科大学, 医学部, 教授 (20098619)
相賀 裕美子 国立遺伝学研究所, 系統生物研究センター, 教授 (50221271)
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| Keywords | 発生・分化制御 / 酵素作用の機作 / 形態形成 / 胚葉形成・原腸形成・体節形成 / 発生遺伝 / 進化発生 |
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| Research Abstract |
PC6は、Furinファミリーに属するプロテアーゼで、骨形成タンパク質(BMP)などの前駆体を切断し成熟型に変換する。代表者は、このPC6による反応が、両生類胚の頭尾軸にそった形態形成と関連している可能性を発見した。本研究は、この反応がマウス胚の発生においても必須の反応であるのか解明することを最終目的としている。
マウス胚の発生時期や領域特異的にPC6の発現を阻害するために、まずコンディショナルKOマウスの作成を行なっている。PC6遺伝子の開始コドンを含むエクソンの前後にloxP配列が挿入されたES細胞を4系統得ることができた。現在キメラマウスの作成を行なっている。
これと並行して、ドミナントネガティブPC6変異体の作製を行なった。線虫やショウジョウバエで報告されているFurinファミリーの変異体のデータ等を参考に、前駆体領域や活性中心に変異を導入したPC6変異体を作成した。両生類胚を使って、形態形成に及ぼす効果を検討したところ、PC6の活性中心に結合し活性を制禦する前駆体領域由来のペプチドが、低濃度で内在のPC6の活性を抑制することがわかった。マウス胚で検証するために、このペプチドをコードする遺伝子を、CAGSプロモーターとloxP配列で挟まれたCAT遺伝子の下流に挿入したコンストラクトを用いて、TGマウスを作成した。コピー数の異なる複数の系統を得ることができた。体節中胚葉系譜特異的にCreを発現するHes7-Creマウスと交配し阻害効果を解析しているところである。いずれも最終的な成果が得られるまでには至っていないが、鋭意解析を進めている。
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